[发明专利]使用色谱纯化蛋白质的方法

权利要求书

1.一种从混合物中纯化蛋白质的方法，其包括在操作条件下以流通模式进行组合的阳离子交换色谱(CEX)和阴离子交换色谱(AEX)或组合的AEX和CEX(“组合色谱”)，其中在所述AEX与所述CEX之间不使用自动化、工程控制和/或在线调节。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述AEX和所述CEX直接连接。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中不调节所述AEX与所述CEX之间的pH和/或电导率。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述蛋白质具有高于约6.5、约6.6、约6.7、约6.8、约6.9、约7.0、约7.1、约7.2、约7.3、约7.4、约7.5、约7.6、约7.7、约7.8、约7.9、或约8.0的等电点(pI)。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述蛋白质具有低于约12.0、约11.9、约11.8、约11.7、约11.6、约11.5、约11.4、约11.3、约11.2、约11.1、约11.0、约10.9、约10.8、约10.8、约10.7、约10.6、约10.5、约10.4、约10.3、约10.2、约10.1、或约10.0的等电点(pI)。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述蛋白质具有在约7.0与约11.0之间、在约7.0与约10.0之间、在约6.5与约10.5之间、或在约7.2与约9.6之间的pI。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述蛋白质具有约6.5、约7.0、约7.5、约8.0、约8.0、约8.5、约9.0、约9.5、约10.0、约10.5、或约11.0的pI。

8.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述蛋白质具有低于约6.5、约6.4、约6.3、约6.2、约6.1、约5.9、约5.8、或约5.7的等电点(pI)。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述蛋白质具有高于约1.0、约2.0、约3.0、约4.0、或约5.0的等电点(pI)。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中所述蛋白质具有在约1.0与约6.5之间、在约2.0与约6.0之间、在约2.5与约6.5之间、或在约2.0与约5.8之间的pI。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述蛋白质具有约6.5、约6.4、约6.3、约6.2、约6.1、约6.0、约5.9、约5.8、约5.7、约5.6、或约5.5的pI。

12.根据权利要求4至7中任一项所述的方法，其中所述组合色谱包括添加负载缓冲液并且添加追逐缓冲液。

13.根据权利要求8至11中任一项所述的方法，其中所述组合色谱包括添加负载缓冲液并且添加追逐缓冲液。

14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述负载缓冲液具有高于约6.0、约6.5、约7.0、约7.5、约8.0、约8.5、约9.0、约9.5、或约10.0的pH。

15.根据权利要求12至14中任一项所述的方法，其中所述负载缓冲液具有在约6.0与约11.0之间、在约6.5与约11.0之间、在约7.0与约10.5之间、在约7.0与约10.0之间、在约7.0与约9.5之间、在约7.0与约9.0之间、在约7.0与约8.5之间、在约7.0与约8.0之间、或在约7.0与约7.5之间的pH。