[发明专利]用于治疗重症联合免疫缺陷的包含细胞穿透肽和腺苷脱氨酶的融合蛋白的药物组合物

说明书

本发明涉及包含细胞穿透肽和腺苷脱氨酶的融合蛋白作为活性成分的组合物，其中所述组合物由于腺苷脱氨酶的细胞通透性的提高而可有效用于治疗重症复合免疫缺陷。

技术领域

本公开内容涉及细胞穿透肽和腺苷脱氨酶的缀合物，以及用于治疗重症联合免疫缺陷的包含所述缀合物的药物组合物。

背景技术

重症联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency，SCID)是一种原发性免疫缺陷病，其特征在于由于参与免疫系统发育的基因异常而导致T淋巴细胞缺陷和B淋巴细胞介导的免疫功能受损。患有重症联合免疫缺陷的患者非常易受细菌、病毒或真菌的感染，因为几乎没有或没有T淋巴细胞和B淋巴细胞参与患者的免疫系统。另外，在健康人群中不引起重度感染的微生物可在患有重症联合免疫缺陷的患者中引起威胁生命的感染。甚至不引起疾病的微生物也可在患有重症联合免疫缺陷的患者中引起重度感染。

重症联合免疫缺陷可分类为X连锁重症联合免疫缺陷(X-linked severecombined immunodeficiency，X-SCID)和常染色体隐性重症联合免疫缺陷。常染色体隐性联合免疫缺陷的一些已知实例包括腺苷脱氨酶(adenosine deaminase，ADA)缺乏症、Jak3(Janus激酶3)缺陷、IL-7Rα(白介素-7受体α)缺陷、RAG1(重组激活基因1)、RAG2缺陷、Artemis缺陷和CD45缺陷。

ADA缺陷是由20号染色体的长臂(20q12-13.11)中的基因突变引起的，该基因编码腺苷脱氨酶(ADA)。ADA是T淋巴细胞代谢必不可少的酶，并且如果缺乏该酶，则毒性代谢产物积累在淋巴细胞中，导致淋巴细胞死亡。治疗ADA的方法包括移植具有正常ADA基因的造血干细胞的方法，以及通过肌内注射施用PEG-ADA(经聚乙二醇修饰的腺苷脱氨酶；Andagen)的酶替代治疗方法。

同时，细胞穿透肽(cell-penetrating peptide，CPP)是细胞膜可渗透肽，其各自由约10至60个氨基酸的短肽组成，并且主要来源于蛋白质转导结构域或膜转运序列。已知的是，与外来物质的一般的胞内转导途径不同，CPP可在不损伤细胞膜的情况下移入细胞内，并且甚至可胞内递送已知不通过细胞膜的DNA或蛋白质。

本发明人已经对来源于HIV(人免疫缺陷病毒)核衣壳的细胞穿透肽进行了研究，并且已发现该细胞穿透肽可提高ADA的细胞通透性，从而完成了本公开内容。

发明内容

技术问题

本公开内容的一个目的是提供包含细胞穿透肽和腺苷脱氨酶的缀合物、用于治疗重症联合免疫缺陷的包含所述缀合物作为活性成分的药物组合物、用于治疗重症联合免疫缺陷的方法，及其用途。

技术解决方案

本公开内容的一个方面提供了缀合物，其包含：包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的细胞穿透肽；以及如SEQ ID NO：2的氨基酸序列所示的腺苷脱氨酶。

本公开内容的另一个方面提供了编码所述缀合物的多核苷酸。

本公开内容的又一个方面提供了包含所述多核苷酸的重组载体。

本公开内容的另一个方面提供了包含所述重组载体的宿主细胞。

本公开内容的又一个方面提供了用于产生缀合物的方法，该方法包括步骤：(a)在培养基中培养宿主细胞；以及(b)从培养基中回收缀合物。

本公开内容的另一个方面提供了用于治疗重症联合免疫缺陷的包含缀合物作为活性成分的药物组合物。

根据本公开内容的一个实施方案，所述重症联合免疫缺陷可以是腺苷脱氨酶缺乏症。

本公开内容的另一个方面提供了用于治疗重症联合免疫缺陷的方法，该方法包括将所述组合物施用于对象的步骤。