[发明专利]一种均相化学发光测定试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及一种均相化学发光免疫测定试剂盒，其包括至少两种组合物，其中第一组合物包含第一受体以及与之结合的第一抗体或其结合片段，所述第一抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的第一表位的检测抗体；第二组合物包含第二受体以及与之结合的第二抗体或其结合片段，所述第二抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的第二表位的检测抗体；所述受体与活性氧作用可产生化学发光，所述第一表位和所述第二表位没有重叠部分；所述第一抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力高于所述第二抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力；同时，第一抗体或其结合片段与所述第一受体的质量比低于所述第二抗体或其结合片段与第二受体得质量比。

技术领域

本发明属于均相化学发光检测技术领域，具体涉及一种均相化学发光测定试剂盒及其应用。

背景技术

自1959年建立放射免疫分析以来，酶免疫分析、荧光免疫分析、化学发光免疫分析(含电化学发光、光激化学发光)等技术相继建立，特别是以“纳米微球”、“全自动化”和“光信号”为特征化学发光免疫分析，已发展至相当成熟阶段并得到广泛应用。无论何种标记免疫分析，它们都源于免疫化学和标记分析的基本原理。所谓“免疫化学”指抗原-抗体特异性结合，给予此种检测方法的高度特异性；所谓“标记分析”指采用高灵敏的信号分子(放射性核素、荧光素、发光剂等)，确保此种检测方法的高度敏感性。针对大分子物质(蛋白)而言，具有多个抗原表位(也是抗体结合位置)，常采用双抗体夹心模式。

发光免疫分析具有很好分析性能，分析特异性、分析灵敏度、自动化操作等较好满足临床要求。但是，针对某些特殊指标如hCG、HBs-Ag、AFP等，对功能灵敏度和检测范围均有很高的要求，而现有化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析、光激化学发光免疫分析等尚存在缺陷，不能有效兼顾功能灵敏度和分析范围的特殊要求。因此，亟需一种化学发光检测技术，其能兼顾功能灵敏度和分析范围的要求。

发明内容

本发明针对现有技术的不足提供了一种均相化学发光测定试剂盒，所述试剂盒中包括“差异性受体微球”(与不同亲合力抗体分别偶联的受体微球的混合物)，进而使得所述试剂盒同时具有优异的功能灵敏度和检测范围。

为此，本发明第一方面提供了一种均相化学发光免疫测定试剂盒，其包括至少两种组合物，其中第一组合物包含第一受体以及与之结合的第一抗体或其结合片段，所述第一抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的第一表位的检测抗体；第二组合物包含第二受体以及与之结合的第二抗体或其结合片段，所述第二抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的第二表位的检测抗体；所述第一抗体或其结合片段和所述第二抗体或其结合片段对于被分析物具有不同的亲和力；所述受体与活性氧作用可产生化学发光，

所述第一表位和所述第二表位没有重叠部分；

所述第一抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力高于所述第二抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力；同时，

第一抗体或其结合片段与所述第一受体的质量比低于所述第二抗体或其结合片段与第二受体得质量比。

在本发明的一些实施方式中，所述第一抗体或其结合片段与所述第一受体的质量比为1:(10～200)，优选为1:(20～180)，更优选为1:(40～160)。

在本发明的另一些实施方式中，所述第一组合物在所述试剂盒中的浓度高于所述第二组合物在所述试剂盒中的浓度。

在本发明的一些优选的实施方式中，所述第一组合物在所述试剂盒中的质量浓度与所述第二组合物在所述试剂盒中的质量浓度比为(5～100):1，优选为(10～50):1，更优选为(15～25):1。

在本发明的一些具体实施方式中，所述第一组合物在所述试剂盒中的质量浓度为5～500ug/ml，优选为10～250ug/ml，更优选为15～200ug/ml。

在本发明的一些实施方式中，所述第一组合物与所述第二组合物单独分散在同一种缓冲液中。