[发明专利]抑制LYN激酶引起的MLCK激活的融合多肽及其应用

说明书

本发明公开了抑制LYN激酶引起的MLCK激活的融合多肽及其应用。本发明提供了一种融合多肽，由MLCK蛋白的第456‑471位氨基酸与穿膜肽连接而成。所述穿膜肽由9个精氨酸残基组成；所述MLCK蛋白的第456‑471位氨基酸的序列如SEQ ID No.1的第11‑26位所示。本发明根据首次发现的LYN激酶与MLCK相互作用的分子机制设计了具有抑制LYN激酶引起的MLCK激活的融合多肽，经实验证明，该融合多肽细胞水平抑制MLCK激活的功能，并可以抑制肿瘤细胞迁移的能力，具有作为临床药物的巨大潜力。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别涉及抑制LYN激酶引起的MLCK激活的融合多肽及其应用。

背景技术

分子靶向药物是利用肿瘤细胞与正常细胞之间的分子生物学差异，特异性地抑制肿瘤细胞的生长增殖，最后诱导肿瘤细胞的凋亡。酪氨酸激酶抑制剂是目前临床上使用较多的一类分子靶向药物。酪氨酸蛋白激酶Lyn是人类中由LYN基因编码的蛋白质。Lyn是Src蛋白酪氨酸激酶家族的成员，该蛋白酪氨酸激酶主要在造血细胞，神经组织肝脏和脂肪组织中表达。在各种造血细胞中，Lyn已成为参与细胞活化调节的关键酶，与慢性髓系白血病的发生密切相关。临床上常用的阿昔替尼，达沙替尼均为LYN活性的抑制剂。

目前，并没有特异干预LYN与某些底物的临床药物和方法。只能针对总体活性进行干预，有时并不能有效的控制病情，同时具有相当程度的副作用。因此，开发有效的特异干预LYN与重要底物的结合的药物具有重要的临床作用。

大约有90％癌症相关的死亡都是由于肿瘤细胞转移(Metastasis)，这是在临床治疗方面急需解决的难题之一。为了从原发肿瘤部位转移出去，恶性肿瘤细胞会利用不同的方式进行迁移。Myosin II引发的肌球蛋白收缩控制着细胞骨架重塑和肿瘤细胞转移，高水平的Myosin II引发的肌球蛋白收缩是维持基于变形泡的迁移的关键因素。Myosin II活性主要由轻链MLC2的磷酸化调控。而MLCK是目前发现的以MLC2为唯一底物的激酶。所以，抑制MLCK可以抑制MLC2的磷酸化，即抑制Myosin II活性。因此，能够抑制MLCK激活的药物成为目前寻求抑制癌症转移的新的途径。

发明内容

本发明的目的是提供一种能够抑制LYN激酶引起的MLCK激活的融合多肽及其应用。

第一方面，本发明要求保护一种融合多肽。

本发明所要求保护的融合多肽，由MLCK蛋白的第456-471位氨基酸与穿膜肽连接而成。

进一步地，所述穿膜肽为由9个精氨酸残基组成短肽。

进一步地，本发明中的MLCK来自大鼠MLCK，但与人和小鼠的序列有高的同源性，并且可以竞争起作用。所述MLCK蛋白的第456-471位氨基酸的序列如SEQ ID No.1的第11-26位所示。

进一步地，所述穿膜肽连接于所述MLCK蛋白的第456-471位氨基酸的N端。

更进一步地，所述融合多肽的氨基酸序列具体如SEQ ID No.1所示，具体如下：

GRRRRRRRRR-IVEIYEDGTSHYLCLP。

第二方面，本发明要求保护一种融合多肽修饰物。

本发明要求保护的融合多肽修饰物为用标记物对前文所述融合多肽进行标记后所得。

进一步地，所述标记物可为生物素。相应的，所述融合多肽修饰物具体如下：

Biotin-GRRRRRRRRR-IVEIYEDGTSHYLCLP

第三方面，本发明要求保护一种多肽。

本发明所要求保护的多肽为前文所述融合多肽中的所述MLCK蛋白的第456-471位氨基酸。