[发明专利]一种热稳定性提高的枯草蛋白酶E突变体及其应用有效
| 申请号： | 201911403670.7 | 申请日： | 2019-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN111004794B | 公开（公告）日： | 2022-07-22 |
| 发明（设计）人： | 张娟;汤恒;堵国成;陈坚 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/56 | 分类号： | C12N9/56;C12N15/57;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 热稳定性 提高 枯草 蛋白酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种枯草芽孢杆菌(
2.编码权利要求1所述枯草芽孢杆菌蛋白酶E突变体的基因。
3.含有权利要求2所述基因的重组质粒。
4.根据权利要求3所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒是在pET系列质粒、pGEX系列质粒、pPICZ系列质粒、pAN系列质粒或pUB系列质粒中的任意一种质粒的基础上构建得到的。
5.一种表达权利要求1所述枯草芽孢杆菌蛋白酶E突变体的基因工程菌。
6.根据权利要求5所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是细菌。
7.根据权利要求5所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是酵母或者其他真菌。
8.一种增强枯草芽孢杆菌蛋白酶E热稳定性的方法，其特征在于，是在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的基础上，将第264-268位的环序列SSGSS突变为天冬氨酸N。
9.一种生产枯草芽孢杆菌蛋白酶E的方法，是培养权利要求5～7任一所述基因工程菌，诱导获得枯草芽孢杆菌蛋白酶E蛋白。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述培养是将权利要求5～7任一所述基因工程菌接种到LB培养基中，35-39℃温度下培养8-14h，得到种子液；按1-10％接种量将种子液接到LB液体培养基，在35-39℃，200-220rpm培养至OD600＝0.9-1.1，加入终浓度为0.1-1.0mM IPTG，于15-17℃诱导培养12-16h。
11.权利要求1所述枯草芽孢杆菌蛋白酶E突变体在洗涤剂、皮革或食品领域中的应用。
12.权利要求1所述枯草芽孢杆菌蛋白酶E突变体在乳制品领域中的应用。
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