[发明专利]一种合成对羟基扁桃酸的方法

权利要求书

1.一种生产对羟基扁桃酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌是以大肠杆菌（Escherichia coli）为宿主，双质粒表达系统表达丙酮酸脱羧酶、苯乙醛脱氢酶和NADH氧化酶，所述双质粒为pETDuet-1质粒和pRSFDuet-1质粒。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述pETDuet-1质粒用于表达苯乙醛脱氢酶、NADH氧化酶，所述pRSFDuet-1质粒用于表达丙酮酸脱羧酶。

3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述丙酮酸脱羧酶选自热带假丝酵母（Candida tropicalis），所述苯乙醛脱氢酶选自大肠杆菌（Escherichia coli）MG1655，所述NADH氧化酶选自枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）168。

4.根据权利要求1-3任一所述的重组菌，其特征在于，所述宿主为E.coli BL21(DE3)。

5.一种转化对羟基苯甲醛和乙醛酸生成对羟基扁桃酸的方法，其特征在于，所述方法利用权利要求1-4任一所述的重组菌将对羟基苯甲醛和乙醛酸转化为对羟基扁桃酸，并偶联辅酶再生系统。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述辅酶再生系统以NADH为底物，通过NADH氧化酶将NADH转化为NAD⁺。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述转化的条件是：pH 6~8，转化温度为30~37℃，转化时间20~24 h。

8.根据权利要求5所述的方法，所述对羟基苯甲醛的初始反应浓度为5～30mM，对羟基苯甲醛与乙醛酸的比例为1：1~2。

9.根据权利要求6-8任一所述的方法，其特征在于，用所述重组菌的湿细胞进行转化；所述转化体系中添加了Mg²⁺、TPP和NAD⁺。

10.权利要求1-4任一所述的重组菌在制药或化工领域中生成对羟基扁桃酸的应用。