[发明专利]一种食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法在审
| 申请号： | 201911364355.8 | 申请日： | 2019-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN113049815A | 公开（公告）日： | 2021-06-29 |
| 发明（设计）人： | 张慧;徐青青;孙玉梅;孙倩;鲁雯思 | 申请（专利权）人： | 上海益诺思生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N15/14 |
| 代理公司： | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人： | 薛琦;吕学辰 |
| 地址： | 201203 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 食蟹猴 淋巴细胞 流式圈门 方法 | ||
1.一种食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，其包括：通过侧向光和CD45荧光检测经CD45抗体孵育过的食蟹猴全血细胞，圈出食蟹猴全血中的淋巴细胞。
2.如权利要求1所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，所述流式圈门方法还包括用CD4荧光圈出经CD4抗体孵育过的食蟹猴全血中的CD4+T淋巴细胞。
3.如权利要求1或2所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，所述流式圈门方法还包括用CD8荧光圈出经CD8抗体孵育后的食蟹猴全血中的CD8+T淋巴细胞。
4.如权利要求1-3任一项所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，所述孵育的时长为45min。
5.如权利要求1-4任一项所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，所述流式圈门方法还包括在所述孵育后去除食蟹猴全血中的红细胞。
6.如权利要求5所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，所述除去食蟹猴全血中的红细胞的方法为用溶血剂孵育。
7.如权利要求6所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，用溶血剂孵育的时长为20min。
8.如权利要求1-7任一项所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，所述流式圈门方法包括：
1)将抗猴CD45抗体、CD4抗体和CD8抗体加入食蟹猴全血，避光孵育；
2)将溶血剂加入经步骤1)处理后的食蟹猴全血；
3)调整流式细胞仪各荧光通道电压，使细胞分为5类，并将该电压设置为模板；用流式细胞仪的侧向光和CD45荧光检测经步骤2)处理后的食蟹猴全血，圈出淋巴细胞；
4)用CD4和CD8荧光圈出CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞。
9.如权利要求8所述的食蟹猴淋巴细胞的流式圈门方法，其特征在于，所述CD45抗体、所述CD4抗体或者所述CD8抗体与所述食蟹猴全血的体积比为1:10。
10.如权利要求8或9所述的流式圈门方法，其特征在于，步骤1)中所述的避光孵育的时长为45min。
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