[发明专利]一种奈西立肽的肽图分析方法及其应用有效
| 申请号： | 201911338579.1 | 申请日： | 2019-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN110988244B | 公开（公告）日： | 2022-07-05 |
| 发明（设计）人： | 李帅;苏春所;刘美;卓芳芳 | 申请（专利权）人： | 上海景峰制药有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/88 | 分类号： | G01N30/88 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 201900*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 奈西立肽 分析 方法 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种奈西立肽的肽图分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
将奈西立肽还原并烷基化，加入肽链内切酶进行酶解，之后使用LC-UV-MS检测，并根据采集到的肽图数据对所述奈西立肽酶解后形成的多肽片段和/或氨基酸残基进行归属；
还原剂为二硫苏糖醇；
所述二硫苏糖醇的摩尔浓度为0.1-0.4mol/L；
烷基化试剂为碘乙酰胺；
所述碘乙酰胺的摩尔浓度为0.25-0.5mol/L；
所述肽链内切酶为胰蛋白酶和/或糜蛋白酶；
所述LC-UV-MS的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为甲酸水溶液，所述流动相B为甲酸乙腈溶液；
所述甲酸水溶液中甲酸的体积分数为0.1-1％；
所述甲酸乙腈溶液中甲酸的体积分数为0.1-1％；
所述LC-UV-MS采用梯度洗脱：
色谱柱为C18色谱柱，ACQUITY BEH 1.7×150mm，
液相色谱的流动相梯度洗脱条件选自如下3个表格所示的任一种：
和
时间(min) A相(％) B相(％) 0 97 3 2.5 97 3 9 60 40 12 3 97 16 3 97 16.2 97 3 20 97 3
。
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