[发明专利]索玛鲁肽氨基端甲醛化物及其制备方法

权利要求书

1.一种索玛鲁肽氨基端甲醛化物，具有式II结构：

2.权利要求1所述的索玛鲁肽氨基端甲醛化物的制备方法，所述方法包括：固相多肽合成法制备侧链全保护索玛鲁肽氨基端甲醛化物主链肽-树脂，侧链全保护索玛鲁肽氨基端甲醛化物主链肽-树脂的裂解，索玛鲁肽氨基端甲醛化物主链粗品的纯化，索玛鲁肽氨基端甲醛化物粗品的制备，索玛鲁肽氨基端甲醛化物粗品的纯化及冷冻干燥。

3.根据权利要求2所述的索玛鲁肽氨基端甲醛化物的制备方法，其包括如下步骤：

(1)以Fmoc-Gly-Wang树脂或Fmoc-Gly-2-Chlorotrityl树脂为原料，加入氨基脱保护试剂，脱除所述树脂上的Fmoc保护基；

(2)将步骤(1)脱除Fmoc保护基的树脂在活化助剂和缩合剂存在下采用固相合成逐一偶联的方式依次连接Fmoc保护的氨基酸，每一个偶联反应均以茚三酮检测阴性为反应终点，每一轮Fmoc氨基酸偶联反应完毕后都使用氨基脱保护试剂脱除Fmoc保护基，然后再与下一个Fmoc保护的氨基酸进行偶联反应；重复操作直至合成得到氨基酸侧链官能团全保护[2-31]-索玛鲁肽主链肽-树脂：

Fmoc-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-树脂

(3)将步骤(2)制备得到的氨基酸侧链官能团全保护[2-31]-索玛鲁肽主链肽-树脂用氨基脱保护试剂脱除Fmoc保护后，再与(S)-(Boc)₂-组氨酸甲醛化物(式Ⅲ)在活化助剂和缩合剂存在下进行固相偶联反应，得到氨基酸侧链官能团全保护的索玛鲁肽氨基端甲醛化物主链肽-树脂；

(4)经酸性裂解试剂裂解同步除去氨基酸侧链官能团全保护的索玛鲁肽氨基端甲醛化物主链肽-树脂上的树脂和保护基团，经沉淀，得到索玛鲁肽氨基端甲醛化物的主链粗品；

(5)将上述步骤(4)得到的索玛鲁肽氨基端甲醛化物主链粗品经反相高效液相色谱进行纯化；

(6)将上述步骤(5)经纯化得到的索玛鲁肽氨基端甲醛化物主链与索玛鲁肽谷氨酰胺脂肪侧链进行偶联得到带有保护基的索玛鲁肽氨基端甲醛化物，并用酸性裂解试剂脱去谷氨酰胺脂肪侧链上的两个叔丁基保护基，得到索玛鲁肽氨基端甲醛化物粗品；

带有两个叔丁基保护基的索玛鲁肽谷氨酰胺脂肪侧链的活性酯具有式(Ⅳ)结构：

(7)将上述步骤(6)所得到的索玛鲁肽氨基端甲醛化物粗品经过反相高效液相色谱进行纯化，合并纯化后的组分，经过冷冻干燥得到索玛鲁肽氨基端甲醛化物纯品。

4.根据权利要求3所述的索玛鲁肽氨基端甲醛化物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述氨基脱保护剂为10～30％(V/V)哌啶(PIP)/N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液，优选为20％；所述氨基脱保护剂用量为每毫摩尔投料树脂20～40ml，优选为每毫摩尔投料树脂30ml；脱保护反应时间为20～50分钟，优选为30～40分钟。