[发明专利]一种用于磁珠法核酸提取的试剂盒、磁珠及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201911311308.7 申请日: 2019-12-18
公开(公告)号: CN112980830B 公开(公告)日: 2023-06-20
发明(设计)人: 黄超杰;鲁津津;黄硕;路通;耿春雨;陈芳;蒋慧 申请(专利权)人: 深圳华大智造科技股份有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/6806
代理公司: 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 代理人: 李小焦;彭家恩
地址: 518083 广东省深圳*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 磁珠法 核酸 提取 试剂盒 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种用于磁珠法核酸提取的试剂盒,包括细胞裂解液、磁珠和洗涤液,其特征在于:所述细胞裂解液由25mmol/L Tris-HCL、10mmol/L pH8.0的乙二胺四乙酸、4mol/L异硫氰酸胍、2vol%的Triton X-100、50g/L的3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸、5g/L的N-月桂酰肌氨酸钠、0.28mol/L NaCl、0.1vol%的Antifoam204、100g/L的聚乙二醇组成;

所述洗涤液不含乙醇或异丙醇,所述洗涤液由20mmol/L的Tris-HCL、0.5mol/L的NaCl、100g/L的聚乙二醇组成;

所述磁珠内核为具有超顺磁性的纳米微球,外部包被树脂和硅羟基修饰材料,所述磁珠的粒径为200~350nm,磁响应时间为1~2分钟,所述磁珠的制备方法包括以下步骤:a)纳米微球的制备:将FeCl3-6H2O、无水乙酸钠和PEG 2000加入乙二醇溶液中,混匀,在氮气气氛下,室温搅拌30分钟~1小时;然后在氮气气氛下,150℃~200℃反应4~8小时;反应结束后,反应产物在磁场作用下,去除上清,即获得纳米微球,采用去离子水清洗纳米微球,备用;b)纳米微球表面基团修饰:取步骤a)制备的纳米微球,加入无水乙醇和氨水的混合溶液中,在通入氮气的条件下搅拌,并缓慢滴加正硅酸乙酯和聚硅氧烷混合液,室温反应3~6小时,反应产物在磁场作用下,去除上清,采用去离子水清洗,即制备获得所述磁珠。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述聚乙二醇为PEG4000、PEG6000或PEG8000。

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