[发明专利]幽门螺杆菌磁微粒化学发光法检测试剂

说明书

本发明涉及生物学检测技术领域，尤其涉及幽门螺杆菌磁微粒化学发光法检测试剂。本发明提供的幽门螺杆菌磁微粒化学发光法检测试剂盒，包括包被Hp抗原的磁微粒，所述Hp抗原为天然抗原。本发明所述试剂盒以血浆或血清为样品，皆能够准确分辨Hp与其他病原菌，并具有良好的重复性以及抗干扰能力。与溶液选择不当的对照组相比，本发明提供的试剂盒灵敏度与特异性皆更优秀。而对照组即便采用特异性更强的抗原仍无法获得更好的效果。本发明试剂盒检测结果不涉及Hp分型。

技术领域

本发明涉及生物学检测技术领域，尤其涉及幽门螺杆菌磁微粒化学发光法检测试剂。

背景技术

幽门螺杆菌(Helicobacter.Pylori，Hp)是目前发现的人胃中生存的唯一微生物种类，常见感染途径主要是口-口传播和粪-口传播。幽门螺杆菌感染是一个全球性的卫生问题，在不同国家和地区，幽门螺杆菌的感染率各不相同，总体而言，发展中国家感染率要高于发达国家。

幽门螺杆菌感染是胃炎及消化性溃疡的最主要因素，同时也能诱发胃癌发生，与非消化性溃疡的发生也有密切关系。感染后大部分患者出现不同程度的慢性炎症，部分人群会发生消化性溃疡，只有极少数会出现胃部恶性肿瘤。世界卫生组织于1994年正式将幽门螺杆菌列为一类生物致癌因子。

幽门螺杆菌表型分型主要分为两类，I型和Ⅱ型；其中I型菌株具有CagA和(或)VacA，Ⅱ型菌株不具有CagA和VacA。幽门螺杆菌基因高度变异，因此表型分型不完全适用于Hp分型，基因分型逐渐成为幽门螺杆菌分型的主要手段。例如根据CagA3’端EPIYA结构中酪氨酸磷酸化程度可将Hp分为四种类型：EPIYA-A，EPIYA-B，EPIYA-C，EPIYA-D。其中EPIYA-A和EPIYA-B为东西方共有，而EPIYA-C则主要集中在欧洲、北美和澳大利亚等地，EPIYA-D则常见于东亚地区(中国、韩国、日本等地)，并且EPIYA-D的毒性及致癌性要高于EPIYA-C。VacA基因结构可分为信号区s(s1a、s1b、s1c、s2)、中区m(m1、m2)、中间区i(i1、i2)。不同基因结构的Hp菌株在致病性上也有所不同。s1/m1型Hp菌株毒素量大，具有更高的空泡毒性，能够引发胃癌和消化性溃疡。而s1/m2型Hp菌株产中等量毒素，s2/m2或s2/m1型Hp菌株毒素产量少或不产毒素。而在自然状态下，s1/m1和s2m2型Hp菌株其i型只有i1或者i2；s1/m2型Hp菌株i型不同，并且i型决定VacA空泡活性，i1型的VacA与胃腺癌的发生相关。

现有检测幽门螺杆菌感染的方法主要分为两大类：侵入式和非侵入式。其中侵入式主要利用胃镜取材进行相关检测，常见方法有细菌培养、快速尿素酶检测、组织学检测等，非侵入式方法主要有¹³C/¹⁴C呼气试验、粪便抗原检测和血清学抗体检测等，其中呼气试验是目前临床检测幽门螺杆菌最为推荐的方法。但呼气试验¹⁴C放射性较强，不适用于孕妇和老人儿童等群体；¹³C无放射性，适用于所有人群，但价格昂贵。

磁微粒化学发光法是化学发光分析技术与磁性微粒分离技术相结合形成的一种检测方法，近几年快速发展，具有灵敏度高，特异性强，线性范围宽，简单快速，安全无毒，重复性均较高的特点。在磁微粒上偶联Hp抗原，则可利用磁微粒化学发光法可实现对Hp的快速、准确检测。但在检测过程中，各种缓冲液对检测结果的影响比较大，不当的缓冲液会使阳性样品的荧光值降低从而难以与阴性样本区分，因此，目前尚没有良好的以磁微粒化学发光检测Hp抗体的方法。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供幽门螺杆菌磁微粒化学发光法检测试剂，该试剂能够实现对幽门螺杆菌的快速、准确检测。

本发明基于间接法，以幽门螺杆菌Hp抗原为包被抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgG抗体作为酶结合物，建立了幽门螺杆菌IgG抗体的磁微粒化学法检测试剂盒。

本发明提供的幽门螺杆菌磁微粒化学发光法检测试剂盒，其包括包被Hp抗原的磁微粒，所述Hp抗原为天然抗原。