[发明专利]一种枸杞多糖的掺杂鉴别及含量检测方法有效
| 申请号: | 201911296099.3 | 申请日: | 2019-12-16 |
| 公开(公告)号: | CN110927286B | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
| 发明(设计)人: | 李文德;陈尚卫;杨浩;戴军;陈安平;徐一达 | 申请(专利权)人: | 浙江尖峰健康科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86 |
| 代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 彭啟强 |
| 地址: | 321000 浙江省金*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 枸杞 多糖 掺杂 鉴别 含量 检测 方法 | ||
本发明涉及多糖检测技术领域,公开了一种枸杞多糖的掺杂鉴别及含量检测方法,步骤包括,对枸杞进行脱脂、热水浸提和醇沉;用超纯水溶解定容,并混匀过滤;加入复合糖化酶进行酶解,将霉解液中加入无水乙醇,离心,取沉淀加水溶解,过滤;进行水解及衍生反应,得到进样液;对进样液进行色谱分析,通过测量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡萄糖的峰面积百分比,进行掺杂鉴别;通过测量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡萄糖的峰面积百分比得到枸杞多糖总百分比,乘以M1和校正系数0.9后得到枸杞多糖的含量。本发明能够准确的鉴别出枸杞多糖提取物是否掺杂有糊精或者可溶性淀粉,并能够对准确测定掺杂枸杞多糖提取物样品中枸杞多糖的实际含量。
技术领域
本发明涉及多糖检测技术领域,尤其涉及一种枸杞多糖的掺杂鉴别及含量检 测方法。
背景技术
枸杞多糖是我国传统中药枸杞子中的重要生物活性成分,具有调节机体免疫 力、抗氧化、保护神经、降血糖、抗肿瘤等多种生理功效。因此,近年来作为功 能性食品配料的枸杞多糖产品的开发和应用发展较快。
然而,由于目前对枸杞多糖的检测尚缺乏有效的质量检测方法和完善的质量 标准,同时因干燥等工艺的需要,或不排除人为故意掺杂以求较高的多糖含量和 价格,导致目前枸杞多糖产品中往往会掺入较多的麦芽糊精(或可溶性淀粉淀 粉)。现有相关文献的定性定量方法尚不适用于该类产品,即I-KI试剂难以准确 鉴别颜色较深的枸杞多糖产品中是否掺有糊精或淀粉,测定多糖含量的醇沉-苯 酚硫酸法不能完全排除糊精干扰,因而已有的相关标准难以客观鉴别和评价该类 产品质量,其掺杂产品有可能给企业用户和广大消费者带来不应有的利益损失。
近年来,随着人们对食品质量真实性检测技术的日益重视,有研究者根据多 糖水解物中葡萄糖的相对比例推测枸杞多糖样品可能掺有糊精,但目前的这个方 法尚不能确证是否掺杂,且不能准确测定掺杂枸杞样品中枸杞多糖的实际含量。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的是提供一种枸杞多糖的掺杂鉴别及含量检测方法, 能够准确的鉴别出枸杞多糖提取物是否掺杂有糊精或者可溶性淀粉,并能够对准 确测定掺杂枸杞多糖提取物样品中枸杞多糖的实际含量。
本发明通过以下技术手段解决上述技术问题:
一种枸杞多糖的掺杂鉴别及含量检测方法,包括以下步骤,
A1、对枸杞进行多糖提取,包括脱脂、热水浸提、醇沉和干燥,得到枸杞多 糖粗品,称重得到M1;
A2、将枸杞多糖粗品用超纯水溶解,并混匀、过滤,得到预检液;
A3、在预检液中加入复合糖化酶进行酶解,霉解后杀酶得到霉解液,将霉解 液中加入无水乙醇,振摇后静置,离心,取沉淀加水溶解,过滤后得到多糖水溶 解液;
A4、将多糖水溶解液进行水解及衍生反应,得到进样液;
A5、对进样液进行色谱分析,通过测量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡 萄糖的峰面积百分比,进行掺杂鉴别;
A6、通过测量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡萄糖的峰面积百分比得到 枸杞多糖总百分比,乘以M1和校正系数0.9后得到枸杞多糖的含量。
半乳糖、阿拉伯糖、氨基葡萄糖和葡萄糖这4个单糖是枸杞多糖中功能活性 较强的多糖级分的主要单糖组分,因此,半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖及氨基葡萄 糖4个单糖可看作是枸杞多糖中较重要的标志性糖组分,它们的反相色谱指纹特 征即峰面积相对比例可以作为枸杞多糖的重要质量指标,也可以用于鉴别真伪和 掺杂。
进一步,所述步骤A6中的校正系数为0.9。对于分子量不同的单糖聚合成 多糖的校正系数略有不同,但经比较发现,将所有单糖总含量乘以六碳糖的校正 系数0.9计算的结果与分别按枸杞中几种不同分子量单糖的校正系数计得的结 果非常相近,因此,对于单糖含量换算成枸杞多糖含量的校正系数按0.9计更准 确。
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