[发明专利]一种快速检测鸡白痢沙门菌的荧光PCR引物组和试剂盒

说明书

本发明公开了一种快速检测鸡白痢沙门菌的荧光PCR引物组，包括：qpcr‑F：5′‑CGAACCTGCAACAGCTTTAATAGAAAGC‑3′；qpcr‑R：5′‑CTCGTATTTGGTGGCAGTGATGTTC‑3′；Probe：5′‑TATTAGAGTCTAG‑Eclipse‑3′；引物组针对鸡白痢沙门菌rfbs基因。相应的，本发明还提供了基于上述引物组的试剂盒。本发明的引物组和试剂盒具有特异性强和灵敏度高的优点。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，尤其涉及一种快速检测鸡白痢沙门菌的荧光PCR引物组和试剂盒。

背景技术

鸡白痢病(PD)是由鸡白痢沙门菌造成是一种严重的系统性疾病，可进行垂直传播，主要感染小鸡，影响生殖能力并且造成很高的死亡率，母鸡被感染产蛋量严重下降，造成很大的经济损失。

鸡白痢沙门菌的早期快速检测鉴别是该病防控和净化的基础。传统的分离鉴定方法复杂繁琐，同时鸡白痢沙门菌与鸡伤寒沙门菌和肠炎沙门菌都属于沙门菌D血清群，在临床症状上往往相似很难区分，而玻片凝集试验容易产生非特异性反应并且缺乏敏感性，往往发生误判，因此亟需发明一种方便快捷、特异敏感的鸡白痢沙门菌快速检测试剂盒供一线使用。

发明内容

本发明的目的在于提出一种快速检测鸡白痢沙门菌的荧光PCR引物组和试剂盒，具有准确快速检测出鸡白痢沙门菌的特点。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

一种快速检测鸡白痢沙门菌的荧光PCR引物组，包括：

qpcr-F：5′-CGAACCTGCAACAGCTTTAATAGAAAGC-3′；

qpcr-R：5′-CTCGTATTTGGTGGCAGTGATGTTC-3′；

Probe：5′-TATTAGAGTCTAG-Eclipse-3′；

引物组针对鸡白痢沙门菌rfbs基因。

一种快速检测鸡白痢沙门菌的荧光PCR试剂盒，包括反应液，所述反应液包括qpcr-F、qpcr-R和Probe；

qpcr-F：5′-CGAACCTGCAACAGCTTTAATAGAAAGC-3′；

qpcr-R：5′-CTCGTATTTGGTGGCAGTGATGTTC-3′；

Probe：5′-TATTAGAGTCTAG-Eclipse-3′；

引物组针对鸡白痢沙门菌rfbs基因。

进一步的，反应液包括：

5U/μl Ex Taq HS 0.125μl；

10×Ex Taq Buffer 1.5μl；

dNTP Mixture 2μl；

Rnase HⅡ酶(1：10)0.1μl；

DNA 2.5μl；

qpcr-F 0.5μl；

qpcr-R 0.5μl；

Probe 0.25μl；

H₂O 17.525μl。

进一步的，反应液包括的各试剂的用量为：10×Ex Taq Buffer(Mg²⁺plus)20mM；

dNTP Mixture 2.5mM；

DNA 2.5μl；