[发明专利]一种北柴胡与南柴胡配方颗粒的检测方法

权利要求书

1.一种检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，包括如下步骤，

对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a，加入第一溶剂制成所述对照品溶液；

对照标准药材溶液的制备：对照标准药材加水过滤后得到第一滤液，回收水后得到第一残渣，然后加入第二溶剂，经超声、过滤后得到所述对照标准药材溶液；

供试品溶液的制备：供试品配方颗粒研磨后加入第三溶剂，经超声、过滤后得到所述供试品溶液；

色谱条件：照超高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱；梯度洗脱的程序包括：0-8min，流动相A：流动相B的体积比为25-28%：75-72%；8-15min，流动相A：流动相B的体积比为28-29%：72-71%；15-20min，流动相A：流动相B的体积比为29-36%：71-64%；20-28min，流动相A：流动相B的体积比为36-36%：64-64%；28-31min，流动相A：流动相B的体积比为36-40%：64-60%；31-37min，流动相A：流动相B的体积比为40-40%：60-60%；检测波长为211-250nm；柱温35℃；流速0.4ml/min；

测定法：分别吸取对照品溶液、对照标准药材溶液和供试品溶液，注入超高效液相色谱仪，测定；

检测方法：依次采用第一检测方法和第二检测方法对供试品溶液进行检测；

所述第一检测方法为，所述供试品溶液的超高效液相色谱与所述对照标准药材溶液的超高效液相色谱进行检测；

所述第二检测方法为，以供试品溶液中柴胡皂苷c与柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积的比值进行检测；

所述第二检测方法包括，采用公式Ⅰ进行检测，当β小于0.35时，所述供试品配方颗粒为北柴胡配方颗粒；β大于0.35时，所述供试品配方颗粒为南柴胡配方颗粒；

 ；式Ⅰ

其中， S_c为供试品配方颗粒中柴胡皂苷c的超高效液相色谱的峰面积，S_a为供试品配方颗粒中柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积；

其中，第三溶剂为含5%浓氨试液的50%乙醇。

2.根据权利要求1所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述北柴胡对照标准药材溶液在211nm波长下包括4个特征峰：

1号峰的相对保留时间RRT为0.61；2号峰的相对保留时间RRT为0.69；3号峰的相对保留时间RRT为1.00；4号峰的相对保留时间RRT为1.04；

所述北柴胡对照标准药材溶液在250nm波长下包括5个特征峰：

5号峰的相对保留时间RRT为0.78；6号峰的相对保留时间RRT为1.00；7号峰的相对保留时间RRT为1.04；8号峰的相对保留时间RRT为1.17；9号峰的相对保留时间RRT为1.20。

3.根据权利要求1所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述色谱条件：照超高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱；检测波长为211和250nm；流速0.4ml/min；柱长为10cm，柱内径为2.1mm，粒径为1.7μm，柱温35℃；理论板数均按柴胡皂苷a峰计算应均不低于10000。

4.根据权利要求1所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述检测波长为211nm和250nm。

5.根据权利要求4所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述检测方法包括依次采用第一检测方法和第二检测方法对供试品溶液进行检测；

所述第一检测方法为，在检测波长为211nm和250nm下，分别对所述供试品溶液的超高效液相色谱与所述对照标准药材溶液的超高效液相色谱进行对比；

所述第二检测方法为，在检测波长为211nm下，采用公式Ⅰ进行检测，当β不大于0.35时，所述供试品配方颗粒为北柴胡配方颗粒；β大于0.35时，所述供试品配方颗粒为南柴胡配方颗粒；

 ；式Ⅰ

其中， S_c为供试品配方颗粒中柴胡皂苷c的超高效液相色谱的峰面积，S_a为供试品配方颗粒中柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积。