[发明专利]一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法及其制得的压片在审

专利信息
申请号: 201911188479.5 申请日: 2019-11-28
公开(公告)号: CN110849686A 公开(公告)日: 2020-02-28
发明(设计)人: 庞夫花;赵密珍;周宇韬;王珑静;陈晓东;蔡伟建;王静 申请(专利权)人: 江苏省农业科学院
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28
代理公司: 江苏斐多律师事务所 32332 代理人: 王长征
地址: 210000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 获得 草莓 根尖 染色体 压片 方法 及其
【权利要求书】:

1.一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1:材料预处理

将健康的草莓植株根部清洁后,保湿放置30-50h;

步骤2:取材

将新长出的根尖在0.8-1.2cm处剪下,并将剪下的根尖清洗后备用;

步骤3:浓缩、低渗

去除根尖断切面后,将其放入0.002M的8-羟基喹啉中,室温下避光处理2-4h后,处理后用0.075M的KCl浸泡根尖20-40min;

步骤4:固定、解离

用固定液将根尖冷藏固定24h以上,然后清洗去除固定液后,再将根尖放入1M的HCl中,水浴10-20min进行解离;

步骤5:制片预处理

将解离后的根尖清洗后,向其滴加70%冰醋酸,放置3-5min;

步骤6:制片

将根尖置于载玻片上,滴加70%的冰醋酸后,盖上盖玻片,当细胞分散均匀后,再在载玻片上滴加固定液,然后将压片加热固定,以待镜检。

2.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤1中用潮湿的报纸或者纸巾将根部包裹以保湿,置于25℃放置48h。

3.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤2具体操作过程为,在上午9:00-10:00之间,选取新长出的粗根尖,在离根尖1cm处剪下,并将剪下的根尖用去离子水清洗后备用。

4.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤3具体操作过程为,将根尖断面处去掉,放入0.002M的8-羟基喹啉中,室温下避光处理2-4h后,再用0.075M的KCl将根尖浸泡30min。

5.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤4具体操作过程为,用固定液将根尖于4℃下冷藏24h以上,冷藏后用去离子水清洗去除根尖上残留的固定液,再将根尖放入1M的HCl中,60℃水浴处理10-20min。

6.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤5具体操作过程为,将解离后的根尖用去离子水清洗,再将根尖转移至载玻片上,吸去水分后,对其滴加70%冰醋酸,放置3-5min,至分生组织区域呈现白色。

7.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤6具体操作过程为,将根尖转移至新载玻片上,滴加70%的冰醋酸,盖上盖玻片,垫上盖玻片下面一角,轻敲盖玻片使细胞分散均匀,在载玻片上滴加固定液,然后将压片加热固定,以待镜检。

8.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:所述固定液为乙醇:冰醋酸的体积比为3:1的混合液。

9.根据权利要求7所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:对盖玻片数次施加0.01-0.02N/cm2的压强,使细胞分散均匀。

10.一种草莓根尖染色体的压片,其特征在于:由上述任意权利要求所述的方法制得。

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