[发明专利]一种同时载有siRNA和顺铂前药的新型酸敏纳米载体及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种同时载有siRNA和顺铂前药的新型酸敏纳米载体及其制备方法与应用，所述制备方法先合成了一种易于转化、细胞内涵体pH响应的聚乙二醇‑b‑聚(2‑(二异丙基氨基)乙基甲基丙烯酸酯高分子材料，再利用该细胞内涵体pH响应的高分子材料构建新型酸敏纳米载体，用于同时输送siRNA和化疗前体药物。本发明所制备的纳米载体共输送siRNA和prodrug时，能够对内涵体的酸性pH做出响应，加快siRNA和prodrug的胞内释放，沉默化疗耐药相关的靶基因，并增加化疗敏感性，协同杀伤肿瘤细胞。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，更具体地，本发明涉及一种同时载有siRNA和顺铂前药的新型酸敏纳米载体及其制备方法与应用。

背景技术

化疗是肿瘤治疗的基石，但是化疗药物缺乏靶向性，肿瘤细胞被杀伤的同时正常细胞也会受到极大损害(肝肾功能障碍/骨髓移植等)，这导致部分患者无法耐受化疗副作用而中断治疗。

为解决化疗药物缺乏靶向性的问题，有方法提出利用癌驱动相关基因进行治疗。肿瘤细胞中有多种癌驱动相关基因，癌驱动相关基因在肿瘤中相对正常细胞高表达，其与肿瘤的发生/发展，侵袭/转移密切相关。现阶段，针对癌驱动相关基因的药物主要有小分子激酶抑制剂和单克隆抗体，如针对HER2⁺肿瘤的拉帕替尼和曲妥珠单抗。但对癌驱动相关基因的小分子激酶抑制剂和单克隆抗体药效不高，并且容易造成耐药，制备成本高，患者经济负担重。

也有采用白蛋白紫杉醇的技术方案，白蛋白紫杉醇是将白蛋白纳米颗粒作为药物载体，结合紫杉醇的一种纳米化疗药。白蛋白紫杉醇纳米药物具有粒径小、比表面积大、黏附性好的特点，可提高药物的生物利用度，形成较高的局部浓度，从而提高疗效，减少了紫杉醇的毒副作用。并且，因半胱氨酸酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and richin cysteine，SPARC) 在肿瘤内富集，而白蛋白可与SPARC结合，此特性使化疗药物更好的靶向于肿瘤区域。 SPARC虽然在肿瘤中富集，但特异性不够强(普遍存在于正常组织器官中)，化疗药物毒副作用不可避免。

也有采用抗体偶联药物(antibody-drug conjugates，ADCs)的技术方案，抗体偶联药物是将具有靶向性质的抗体和强细胞毒性的药物(主要是化疗药)偶联而成的一种新型抗肿瘤药物，主要由靶向性的抗体、偶联的药物及连接子构成。例如现在针对HER2⁺乳腺癌的TDM-1, 是将人源化抗HER2抗体曲妥珠单抗(trastuzumab，Herceptin)与高活性抗有丝分裂的美登素衍生物DM1偶联而形成抗体偶联药物。由于DM1具有极强的细胞毒性，未能在临床上使用。曲妥珠单抗则可靶向结合于HER2⁺乳腺癌细胞，阻断促进肿瘤生长信号，同时也可激活机体免疫系统攻击肿瘤细胞，TDM1可通过其抗体识别、结合并内化进入HER2阳性肿瘤细胞，在肿瘤细胞内解离释放DM1，从而杀灭肿瘤细胞。而在解离前T-DM1无活性，因此避免了传统化疗药物对正常组织的损伤作用。不过，抗体偶联药物连接子不稳定会使得药物的全身暴露，能和表达相同抗体的正常组织结合，存在脱靶效应，并且价格昂贵。

RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是近年来发展迅速的一种治疗方式，在多种疾病的治疗应用中潜能巨大。和小分子靶向药物相比，siRNA对靶点的选择性会更好，能够特异性结合靶基因并下调靶基因表达，不会影响细胞中其它正常基因的表达。但是RNAi技术在临床转化时最大难题是缺少低毒高效的载体将siRNA输送到病灶部位和细胞内。对于基于RNAi技术的癌症治疗，siRNA在输送过程需要突破一系列生理屏障，例如如何靶向肿瘤细胞、穿透肿瘤组织和细胞膜、从内涵体高效逃逸，以及在细胞质内有效释放siRNA等。虽然使用传统的病毒载体如腺病毒和逆转录病毒传递siRNA可以克服上述各种生理屏障，但那种方式具有制备困难、siRNA容量小、靶向特异性差、免疫原性强等缺点。

发明内容