[发明专利]一种双pH敏感负载化疗药物柔红霉素的纳米传递系统的制备方法

说明书

本发明涉及一种双pH敏感负载化疗药物柔红霉素的纳米传递系统的制备方法。具体步骤为：柔红霉素与对炔基苯甲醛反应生成亚胺键柔红霉素；然后制备高分子载体寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸甲酯‑聚(对叠氮甲基丙烯酸苄酯‑co‑甲基丙烯酸氨基乙酯)，引入两亲性嵌段、叠氮基和氨基；亚胺键柔红霉素的炔基与高分子载体的叠氮基发生点击化学反应得到柔红霉素高分子前药中间体；高分子前药中间体的氨基与2,3‑二甲基马来酸酐反应得到柔红霉素高分子前药，再经过自组装得到聚合物胶束即可。该方法得到的聚合物胶束在正常体循环和癌细胞环境中可根据不同pH条件实现电荷反转，提高靶向性，实现药物的精准传递，降低药物毒副作用，增强抗肿瘤疗效。

技术领域

本发明属于纳米药物制剂领域与高分子化学领域，具体涉及一种双pH敏感负载化疗药物柔红霉素的纳米传递系统的制备方法。

背景技术

随着肿瘤发病率及死亡率急速增长，寻求高效、安全的治疗方法刻不容缓。目前使用的传统化疗药物都是以小分子药物为主，存在许多缺点：低选择性、易代谢、容易产生多药耐药性等。而且由于许多药物属于疏水性药物，用传统的给药方式导致严重的毒副作用。现代纳米载药系统可以解决这些难题得到了快速的发展。纳米药物和传统化疗药物相比具有以下优势：(1)通过内吞的方式被吸收，实现靶向用药，提高药物的生物利用度；(2)提高疏水性药物的溶解性；(3)经过靶向基团修饰后可实现靶向给药，减少用药剂量，降低副作用；(4)延长药物半衰期，提高有效血药浓度及药效；(5)控制药物恒定释放，改善药物的药代动力学参数；(6)消除机体屏障(如血脑屏障、血眼屏障及细胞生物膜屏障)对药物作用的限制；纳米载体通常具有独特的物理和化学性质，与细胞有良好的生物相容性。其中聚合物胶束作为药物传递系统的一种载体类型，两亲性嵌段共聚物在水介质中，疏水性片段形成核，亲水性片段形成壳，自组装形成稳定的核-壳型聚合物胶束。通过亲疏水作用将药物包裹在内核中，亲水性的外壳提高了水溶性。且尺寸小于200nm的聚合物胶束在肿瘤部位有增强渗透和滞留效应，从而在肿瘤部位响应性断裂，释放出药物，从而降低药物的毒副作用。

柔红霉素，作为临床中一线抗癌药物用于肿瘤治疗。其作用机制在于抑制细胞的核酸合成过程。但是人类肝脏中存在的羰基还原酶Ⅰ能够将柔红霉素转化成一种新的柔红霉素醇，这种新的醇代谢物不仅降低了抗癌药物的活性，并具有心脏毒性，造成心机细胞的损伤，由于这一缺点而大大限制了其应用。

因此，设计出一种能够在肿瘤部位响应性的释放柔红霉素药物，并且选择一种无毒，可生物降解的载体材料显得尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种双pH敏感负载化疗药物柔红霉素的纳米传递系统的制备方法，该纳米传递系统可在正常体循环和肿瘤环境中，实现电荷反转，提高靶向性，实现药物的精准传递，降低药物毒副作用，增强抗肿瘤疗效。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

提供一种双pH敏感负载化疗药物柔红霉素的纳米传递系统的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)在避光无氧条件下，对炔基苯甲醛的醛基与柔红霉素(DNR)的氨基发生席夫碱反应，后处理得到亚胺键柔红霉素(imine-DNR)，其中甲醇作为反应溶剂，三乙胺中和柔红霉素中游离的盐酸，反应式为：

(2)在无氧条件下，分子量为300的聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸甲酯(OEGMA)与4-氰基-4-(苯基硫代甲酰硫基)戊酸(CTP)，以1,4-二氧六环为溶剂，偶氮二异丁腈(AIBN)作为引发剂，自身发生本体聚合反应，生成寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸甲酯(POEGMA)；POEGMA与4-叠氮甲基丙烯酸苄酯(ABMA)、甲基丙烯酸氨基乙酯(AMA)在无氧条件下，以N,N-二甲基甲酰胺(DMF)作为溶剂，AIBN作为引发剂，发生可逆加成断裂链转移自由基聚合(RAFT)反应，经过透析、冷冻、干燥之后得到高分子载体寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸甲酯-聚(对叠氮甲基丙烯酸苄酯-co-甲基丙烯酸氨基乙酯)(POPAA)，反应式为：