[发明专利]25-羟基维生素D3

权利要求书

1.25-羟基维生素D₃生产菌株，其特征在于：其分类名为蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)，保藏编号为：CCTCC M 2019385。

2.权利要求1所述的25-羟基维生素D₃生产菌株的筛选方法，其特征在于：从化工厂附近深土层取土样，加入无菌水中制备菌悬液，吸取菌悬液接种于富集培养基，培养后稀释涂布于分离培养基平板，挑取不同形态的代表性单菌落至种子培养基培养，再转接至转化培养基中进行转化实验，萃取转化液用于高效液相色谱检测25-羟基维生素D₃的浓度，从而筛选得到所述25-羟基维生素D₃生产菌株。

3.根据权利要求2所述的筛选方法，其特征在于：

所述富集培养基组分为：0.5g/L酵母粉，5g/L磷酸氢二铵，1g/L磷酸氢二钾，1g/L磷酸二氢钠，0.25g/L无水硫酸镁，20g/L琼脂粉；

分离培养基组分为：0.5g/L维生素D3，5g/L磷酸氢二铵，1g/L磷酸氢二钾，1g/L磷酸二氢钠，0.25g/L无水硫酸镁，20g/L琼脂粉。

4.根据权利要求2所述的筛选方法，其特征在于：

所述种子培养基组分为：5g/L葡萄糖，0.5g/L酵母粉，5g/L磷酸氢二铵，1g/L磷酸氢二钾，1g/L磷酸二氢钠，0.25g/L无水硫酸镁；

转化培养基组分为：5g/L葡萄糖，3g/L酵母粉，5g/L磷酸氢二铵，1g/L磷酸氢二钾，1g/L磷酸二氢钠，0.25g/L无水硫酸镁，β-环糊精10g/L。

5.权利要求1所述25-羟基维生素D₃生产菌株的应用，其特征在于，所述25-羟基维生素D3菌株用于以维生素D3为底物合成25-羟基维生素D₃。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在25-羟基维生素D₃生产菌株合成25-羟基维生素D₃过程中，所述底物维生素D₃溶解于丙二醇或者丙二醇和乙醇的混合溶剂中，其中，丙二醇与乙醇的体积比为10：0～5：5。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，维生素D₃添加时间为稳定期前期，维生素D₃添加浓度为2g/L，培养温度为37℃，pH为7.2。