[发明专利]二乙酸镳草镰刀菌烯醇竞争型气压免疫传感器及检测方法

权利要求书

1.一种二乙酸镳草镰刀菌烯醇竞争型气压免疫传感器，其特征在于：包括单独存放的抗二乙酸镳草镰刀菌烯醇单克隆抗体、酶标条、包被酶标条用二乙酸镳草镰刀菌烯醇-半谷氨酸-乳清蛋白偶联物、过氧化氢溶液、表面修饰羊抗鼠抗体的铂纳米粒子或金核铂壳纳米粒子和用于检测气压的气压检测传感器；所述抗二乙酸镳草镰刀菌烯醇单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO:C201881的杂交瘤细胞菌株DAS5G11E7产生。

2.根据权利要求1所述的二乙酸镳草镰刀菌烯醇竞争型气压免疫传感器，其特征在于：其特征在于：所述的金核铂壳纳米粒子粒径在10-150 nm。

3.根据权利要求1所述的二乙酸镳草镰刀菌烯醇竞争型气压免疫传感器，其特征在于：还包括橡胶条和放置酶标条的金属容器，金属容器上设有气压检测孔，酶标条放置于金属容器中，然后用橡胶条密封后，利用气压检测传感器检测体系压力。

4.根据权利要求1所述的二乙酸镳草镰刀菌烯醇竞争型气压免疫传感器，其特征在于：所述修饰羊抗鼠抗体的铂纳米粒子或金核铂壳纳米粒子的制备方法：将抗小鼠二抗添加到铂纳米粒子或金核铂壳纳米粒子中混匀，孵育一段时间后，加入封闭液封闭，获得表面修饰羊抗鼠抗体的铂纳米粒子或金核铂壳纳米粒子。

5.根据权利要求4所述的二乙酸镳草镰刀菌烯醇竞争型气压免疫传感器，其特征在于：羊抗鼠抗体修饰金核铂壳纳米粒子的时间为6-12 h；羊抗鼠抗体的浓度范围为1-32 μg/mL。

6.一种利用权利要求1所述的二乙酸镳草镰刀菌烯醇竞争型气压免疫传感器检测抗二乙酸镳草镰刀菌烯醇含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

将包被有二乙酸镳草镰刀菌烯醇-半谷氨酸-乳清蛋白偶联物的酶标条加入样品提取液和抗二乙酸镳草镰刀菌烯醇单克隆抗体溶液，孵育，所述抗二乙酸镳草镰刀菌烯醇单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO:C201881的杂交瘤细胞菌株DAS5G11E7产生；

加入修饰羊抗鼠抗体的铂纳米粒子或金核铂壳纳米粒子溶液，孵育，后处理；

将后处理后的包被有二乙酸镳草镰刀菌烯醇-半谷氨酸-乳清蛋白偶联物的酶标条加入过氧化氢溶液，保持一段时间，待过氧化氢反应产气完成后测量其气压值，基于气压值与二乙酸镳草镰刀菌烯醇含量关系，分析获得二乙酸镳草镰刀菌烯醇含量。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述的孵育条件为25-40℃孵育30min-2h；产气反应时间范围为5-20min。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述抗二乙酸镳草镰刀菌烯醇单克隆抗体溶液的浓度 0.25-0.8ug/mL；待测样品加样量范围为20-100 μL。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述的后处理为孵育完成后，弃去包被液，用含有吐温-20的磷酸盐缓冲液清洗酶标条并甩干残余液体。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：在酶标条上包被二乙酸镳草镰刀菌烯醇-半谷氨酸-乳清蛋白偶联物的方法为：将酶标条加入到含有二乙酸镳草镰刀菌烯醇-半谷氨酸-乳清蛋白偶联物的包被缓冲液中，25-40℃孵育1-4 h，接着弃去包被液后，用含有吐温-20的磷酸盐缓冲液清洗酶标条并甩干残余液体，得到包被二乙酸镳草镰刀菌烯醇-半谷氨酸-乳清蛋白偶联物的酶标条。