[发明专利]一种七叶一枝花提取液的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及生物领域，尤其涉及一种七叶一枝花提取液的制备方法及其应用，本申请提供了七叶一枝花提取液的制备方法，并指出七叶一枝花提取液在抑制水稻稻瘟病菌方面的作用。本技术方案的有益效果在于提供了一种可抑制水稻稻瘟病菌的七叶一枝花提取液及其制备方法，且该提取液能诱导水稻防卫基因WRKY45基因、PBZ基因和PR1b基因的表达。

技术领域

本发明涉及生物领域，尤其涉及一种七叶一枝花提取液的制备方法及其应用。

背景技术

稻瘟病是由稻瘟病菌引起的世界性病害，是水稻生产上三大主要病害之一[1]。据相关数据显示，稻瘟病引起的水稻年损失约占总产量的10％-15％，损失达10亿元[2]，严重时减产可达数半。发病时主要以叶片为主，形成或大或小的病斑。目前，培育出抗稻瘟病品种并且将其推广种植是防治稻瘟病最经济有效的方法之一。但是，稻瘟病菌分为许多不同的生理小种，且生理小种复杂多变，极易发生变异[3]，对单一化学药剂容易产生抗药性。六十年代以来，选育出来的抗病品种在推广、栽种的过程中，抗性不断丧失，导致抗病水平越来越低。另外，生产者也通过化学农药来控制病害的发生。但是，化学防治存在环境污染、改变土壤结构和组成的不利因素，且对生产者身体具有高危害性。因此，植物源农药具有广谱的抑菌活性、低残留、无污染等优势。本申请选取了多种武陵山区特色植物提取液，经过反复的筛选，发现七叶一枝花对水稻稻瘟病菌有较好的抑菌作用，通过进一步分离七叶一枝花不同组织部位，并分别制成相应的提取液，进行抗菌活性筛选，为开发对人畜安全、无污染、低毒、低残留的植物源杀菌剂奠定基础。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种可抑制稻瘟病菌的七叶一枝花提取液及其制备方法。

本发明提供的技术方案为一种七叶一枝花提取液，其制备方法如下：

步骤1：将七叶一枝花果皮烘干，研磨成粉末；

步骤2：将步骤1中的粉末用甲醇进行第一次溶解，进行超声、离心后，取上清液；

步骤3：将步骤2所得上清液减压烘干，用蒸馏水充分溶解；

步骤4：将步骤3所得溶液用正丁醇进行萃取，再次减压烘干，加入甲醇进行第二次溶解溶解制得七叶一枝花提取液。

其中，用七叶一枝花的根替换步骤1中的七叶一枝花果皮。

其中，用七叶一枝花的根和果皮混合物替换步骤1中的七叶一枝花果皮。

而且，所述甲醇为无水甲醇。

以及，所述的七叶一枝花提取液对稻瘟病菌的抑制作用。

以及，所述的七叶一枝花提取液对水稻防卫基因表达的促进作用。

而且，所述防卫基因为WRKY45基因、PBZ基因和PR1b基因。

与现有技术相比，该技术方案的有益效果在于：提供了一种可抑制稻瘟病菌的七叶一枝花提取液及其制备方法，该七叶一枝花能有效抑制稻瘟病菌，促进水稻防卫基因表达。而且该提取液是对人畜安全、无污染、低毒、低残留的植物源杀菌剂。

附图说明

图1为七叶一枝花根提取液(正丁醇相)对稻瘟病菌孢子抑菌效果图；

图2为七叶一枝花果皮提取液(正丁醇相)对稻瘟病菌孢子抑菌效果图；

图3为稻瘟灵农药对稻瘟病菌孢子抑菌效果图；

图4为无水甲醇对稻瘟病菌孢子抑菌效果图；

图5为WRKY45基因的相对表达量分析；

图6为PBZ基因的相对表达量分析；

图7为PR1b基因的相对表达量分析。

具体实施方式