[发明专利]一种冻干添加剂及荧光PCR反应混合物干粉和制备方法

权利要求书

1.一种荧光PCR反应混合物干粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、将冻干添加剂A组分、PCR缓冲液、dNTPs、无甘油taq酶以及引物混合物混合均匀并分装，向分装好的溶液中加入冻干添加剂B组分叔丁醇，得到荧光PCR反应混合物原液；所述冻干添加剂A组分由二硫苏糖醇、吐温20、海藻糖、明胶和BSA组成；

所述冻干添加剂A组分在冻干前后的量无变化，在扩增体系中的浓度如下：

二硫苏糖醇的浓度为0.2-1mM，吐温20的浓度为0.2%-1% v/v，海藻糖的浓度为0.05-0.2M，明胶的质量体积比为0.1%-1%，BSA的浓度为0.2-1mg/ml；

所述冻干添加剂B组分叔丁醇浓度为10%-40% v/v；

所述PCR缓冲液在扩增反应体系中的浓度为：100mM氯化钾、2.5mM氯化镁和20mM Tris-HCl缓冲液 Ph8.3；

S2、将步骤S1中分装好的荧光PCR反应混合物原液放入冻干机冻干，冻干程序为：预冻，-15℃，1.5小时；升华，-4℃ 0.5小时；解析干燥10℃，0.5小时，25℃，0.5小时。

2.根据权利要求1所述的荧光PCR反应混合物干粉的制备方法，其特征在于，

A组分在扩增体系中的浓度如下：

二硫苏糖醇的浓度为1mM，吐温20的浓度为0.2% v/v，海藻糖的浓度为0.2M，明胶的质量体积比为1% w/v，BSA的浓度为1mg/ml；

B组分在冻干前的荧光PCR反应混合物原液中的浓度为：叔丁醇的浓度为40% v/v。

3. 根据权利要求1所述的荧光PCR反应混合物干粉的制备方法，其特征在于，B组分在冻干前的荧光PCR反应混合物原液中的浓度为：叔丁醇的浓度为10%-20% v/v。

4.根据权利要求1所述的荧光PCR反应混合物干粉的制备方法，其特征在于，

A组分在冻干前的荧光PCR反应混合物原液中的各物质的浓度与冻干后使用水溶解后的各物质的浓度相同。