[发明专利]一种百部内生链霉菌中吡咯-2-羧酸酯类化合物的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种吡咯-2-羧酸酯类化合物，其特征在于，所述的吡咯-2-羧酸酯类化合物具有如图I所示的结构：

式I中：

R₁和R₂可以相同或不同；

R₁选自氢、甲基、乙基、氨基、甲酰胺基、乙酰胺基中的一种；

R₂选自氢、羟基、羟甲基、羟乙基、氨基、甲酰胺基、乙酰胺基中的一种；

n选自1到5。

2.如权利要求1所述吡咯-2-羧酸酯类化合物，其特征在于，制备方法包括如下步骤：

(1)配制种子培养基：将百部内生链霉菌株BS-1接入种子培养基，26-30℃，培养3-5天得种子培养液；

(2)将步骤(1)得到的种子培养液接入发酵培养基中，26-30℃静置培养6-9天得发酵物；

(3)将步骤(2)制备得到的发酵物中的发酵液和菌丝体分离，菌丝体采用甲醇进行超声提取3-4次，回收甲醇得到粗提物A；上清液加入2-6％的XAD-16树脂，搅拌4-6小时后过滤，弃去滤液，剩下的树脂用甲醇洗脱至无色，回收甲醇得到粗提物B，合并A、B萃取液后减压浓缩得到浸膏；

(4)将步骤(3)所述的BS-1浸膏粗提物，先后采用MCI、反相硅胶、Sephadex LH-20分离材料进行柱色谱分离，并辅以prep-HPLC方法进行纯化，获得单体化合物。

3.如权利要求2所述吡咯-2-羧酸酯类化合物，其特征在于，百部内生链霉菌BS-1需经过下述提取分离方法获得：

(1)百部药材洗净后分别用纯水浸泡，超声，表面消毒；

(2)取步骤(1)中百部药材的根茎叶切碎后放入离心管，加灭菌水0.5-1mL，涡旋，70-80℃热水浴1min，取100-200uL涂板于ISP4和燕麦培养基。

4.如权利要求2所述吡咯-2-羧酸酯类化合物，其特征在于，制备方法中种子培养基中含有：玉米粉40g/L,葡萄糖10.0g/L,麸质粉5.0g/L,麸皮10.0g/L,K₂HPO₄·3H₂O 0.5g/L,CaCO₃ 2.0g/L,(NH₄)₂SO₄ 1.0g/L。

5.如权利要求2所述吡咯-2-羧酸酯类化合物，其特征在于，制备方法中发酵培养基中含有：玉米粉70g/L,麸质粉5.0g/L,麸皮10.0g/L,K₂HPO₄·3H₂O 0.5g/L,CaCO₃ 2.0g/L,(NH₄)₂SO₄ 1.0g/L。

6.如权利要求2所述吡咯-2-羧酸酯类化合物，其特征在于，制备方法中种子培养基和发酵培养基均需120℃灭菌15-20分钟。

7.如权利要求1所述吡咯-2-羧酸酯类化合物在制备杀虫药物中的应用。

8.如权利要求1所述吡咯-2-羧酸酯类化合物在制备杀蚜虫和杀螨虫药物中的应用。