[发明专利]一种用核酸适配体磁珠检测甲胎蛋白的方法在审
| 申请号: | 201911059914.4 | 申请日: | 2019-11-01 |
| 公开(公告)号: | CN112763719A | 公开(公告)日: | 2021-05-07 |
| 发明(设计)人: | 陈瑶;戴露瑶;张汝佳;刘雨欣;黄林林 | 申请(专利权)人: | 温州医科大学 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
| 代理公司: | 北京劲创知识产权代理事务所(普通合伙) 11589 | 代理人: | 杨金贤 |
| 地址: | 325000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 核酸 适配体磁珠 检测 蛋白 方法 | ||
1.一种用于非疾病诊断目的的用核酸适配体磁珠定量检测甲胎蛋白的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将甲胎蛋白核酸适配体与磁珠混合孵育,得到核酸适配体磁珠;
(2)将待测样品与稀释液混合,得到待测样品稀释液;
(3)将所述核酸适配体磁珠与所述待测样品稀释液混合孵育,得到反应液;
(4)用磁分离装置将反应液中的磁珠分离出来,得到吸附有甲胎蛋白的磁珠;
(5)用洗脱液洗脱步骤(4)所述磁珠上的甲胎蛋白,得到待测液;
(6)测定所述待测液中的甲胎蛋白含量,计算得到待测样品中的甲胎蛋白浓度;
所述步骤(1)与(2)不存在时间先后的限定;
所述甲胎蛋白核酸适配体的序列如SEQ ID No.1所示;
所述磁珠的粒径为50~500nm。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述混合孵育的温度为36~38℃,时间为60~240min。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述稀释液为pH值7.5的Tris-HCl缓冲液。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述待测样品与所述稀释液的混合体积比例为1:(8~12)。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述混合孵育的温度为36~38℃,时间为60~240min。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(5)所述洗脱液为TE缓冲液。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(6)所述测定的方法为高效液相色谱法。
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