[发明专利]双重聚糖结合AAV载体的方法和组合物

权利要求书

1.一种来自AAV2、AAV3a、AAV3b、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8或AAV10的腺伴随病毒（AAV）衣壳蛋白，其包含以下氨基酸取代：

a) A266S

b) SQAGASDIRDQSR463-475SX₁AGX₂SX₃X₄X₅X₆QX₇R，其中 X_1–7可以是任意氨基酸；和

c) EYSW 499-502EX₈X₉W, 其中X_8-9可以是任意氨基酸;

其中 (a) – (c)中的取代是AAV2或AAV1、AAV3a、AAV3b、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8或AAV10中对应氨基酸位置的取代，并且

其中所述取代将聚糖结合位点从AAV血清型9(AAV9)引入所述AAV衣壳蛋白内。

2.权利要求1的AAV衣壳蛋白，其中所述AAV衣壳蛋白是AAV2并且：X₁ 是V; X₂ 是P; X_3–6是 NMAV;并且X₇ 是G并且任选地其中X₈是 F并且X₉是A。

3.权利要求1的AAV衣壳蛋白，其中所述AAV衣壳蛋白是AAV2衣壳氨基酸序列，其中引入了以下取代：A266S、Q464V、A467P、D469N、I470M、R471A、D472V、S474G、Y500F和S501A。

4.前述任一项权利要求的AAV衣壳蛋白，其中所述AAV衣壳蛋白是AAV2衣壳氨基酸序列，其中引入了以下取代：A266S、Q464V、A467P、D469N、I470M、R471A、D472V、S474G、Y500F和S501A，并且其中氨基酸585-590 被 QQNTAP取代。

5.权利要求1的AAV衣壳蛋白，其中所述AAV衣壳蛋白是AAV1或AAV6，并且与AAV2的463-475位对应的氨基酸位置上的取代是SX₁X₂X₃PX₄X₅MX₆VQX₇X₈，其中X_1–8 是任意氨基酸，任选地，X_1–3是VAG, X₄是S, X₅是N, X₆ 是A，并且X₇ 是G并且 X₈ 是R, 任选地，对应于AAV2中499-502位的氨基酸位置是X₉FX₁₀W，其中X₉和X₁₀ 是任意氨基酸，任选地，X₉是 E 并且X₁₀是W。

6.权利要求5的AAV衣壳蛋白，其中所述AAV衣壳蛋白是AAV1或AAV6衣壳氨基酸序列，其中引入了以下取代：A267S、SRGSPAGMSVQPK464-476SVAGPSNMAVQGR, 和NFTW500-503EFAW。