[发明专利]一种金黄色葡萄球菌免疫磁珠洗液在审
申请号: | 201911018834.4 | 申请日: | 2019-10-24 |
公开(公告)号: | CN110819690A | 公开(公告)日: | 2020-02-21 |
发明(设计)人: | 曲晓莹;卢勉飞;蔡芷荷;滕昆仑;吴清平;陈博;陈鲁 | 申请(专利权)人: | 广东环凯生物科技有限公司;广东环凯微生物科技有限公司;广东省微生物研究所 |
主分类号: | C12Q1/14 | 分类号: | C12Q1/14 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 郑莹 |
地址: | 526238 广东省肇庆*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 金黄色 葡萄球菌 免疫 磁珠洗液 | ||
本发明公开了一种金黄色葡萄球菌免疫磁珠洗液,通过组分的优化,与常规洗液相比,在洗涤过程中提高了洗液的清洗效果,并且有效降低了食品基质的干扰,而且具有特异持续性增菌的功效,尤其是目标菌含量极低的样品增菌效果显著,从而提高了金黄色葡萄球菌的检出率,为免疫磁珠在试剂检测中的应用提供了保障。
技术领域
本发明属于免疫技术领域,特别涉及一种金黄色葡萄球菌免疫磁珠洗液。
背景技术
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是常见的食源性致病微生物之一,在适当条件下会产生金黄色葡萄球菌肠毒素(Staphylococcus aureus Enterotoxins,SEs),这是食源性致病菌最重要的致病因子。金黄色葡萄球菌广泛分布,外部环境如空气、水、人畜及其排泄物均有其踪迹;内在环境如人和动物的体表、粘膜、呼吸道、鼻咽部和肠道等也有分布。健康人群中30%-50%为金黄色葡萄球菌携带者,因此金黄色葡萄球菌无处不在。
近些年,新型检测技术尤其是分子检测产品的不断涌现,灵敏度得到了提高,但检测结果更容易受到样品基质的影响,检测前样品前处理的重要性变得尤为突出。相比较而言,免疫磁珠是当前样品前处理的最理想手段。作为一种具有特异性的分离富集技术,免疫磁珠在多个领域都有重要的应用价值,如DNA提取、蛋白纯化、细胞筛选、食源性致病微生物富集等。虽然高品质的抗体资源对免疫磁珠特异性富集至关重要,但免疫磁珠在实际样品应用中,复杂的食品基质如肉沫等也会干扰富集过程,造成免疫磁珠的回收率降低从而降低富集效果。因此在免疫富集操作过程中,需要使用免疫磁珠洗液清除食品杂质。但常规免疫磁珠洗液在实际应用中并没有起到很好的效果,在对肉沫等复杂食品样品富集时会损失大量免疫磁珠,从而降低了目标菌的检出率。因此,需要对免疫磁珠洗液的组分进行优化,提高洗液的清洗效果。除此之外,在实际检测中,很多样品的目标菌含量极低,按照国标方法增菌后目标菌含量依然很低,导致检出率不高,洗液中增加特异性增菌成分,在清洗过程中还可以起到持续增菌的效果。
根据现今存在的问题,研制一种金黄色葡萄球菌免疫磁珠洗液成为亟需解决的问题。
发明内容
本发明的首要目的在于提供一种金黄色葡萄球菌免疫磁珠洗液,以降低食品基质的干扰并提高目标菌金黄色葡萄球菌的检出率。
为达到上述目的,本发明所采取的技术方案是:
本发明第一个方面,提出了一种金黄色葡萄球菌免疫磁珠洗液。根据本发明的实施例,所述金黄色葡萄球菌免疫磁珠洗液,其溶液为缓冲液,所述缓冲液中添加有表面活性剂、蛋白质、水溶性糖、无机盐、特异性抑菌剂,其中特异性抑菌剂可以抑制样品中的非目标菌生长。根据本发明的实施例效果,除了提高了洗液的清洗效果,还降低了食品基质的干扰,而且具有特异性持续增菌的功效,尤其是目标菌含量极低的样品增菌效果显著,从而提高了金黄色葡萄球菌的检出率。
根据本发明的实施例,其溶液为缓冲液,所述缓冲液中添加有0.2~1.4g/L表面活性剂、4.0~28.5g/L蛋白质、5.5~19.5g/L水溶性糖、3.5~5.5g/L无机盐和4.5~6.5mg/L特异性抑菌剂。
根据本发明的实施例,所述表面活性剂选自Tween-20、TritonX-100和OHODASURFON-870的至少一种;
所述蛋白质选自胰蛋白胨、牛血清白蛋白和乳白蛋白的至少一种;
所述水溶性糖选自乳糖、葡萄糖;无机盐选自NaCl、KCl的至少一种;
所述特异性抑菌剂选自两性霉素B、多粘菌素B的至少一种。
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