[发明专利]酶催化制备半胱氨酸寡肽及其膜敷料的制备方法

权利要求书

1.一种酶催化制备半胱氨酸寡肽的方法，其特征是该方法包括以下步骤：

a₁、在25~50 mL磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中加入20~40 g 的L-半胱氨酸甲酯盐酸盐、全氟叔丁醇和50~100U蛋白酶，反应混合物在20~50℃下搅拌反应6~12小时；其中，磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中含有0.1~0.2M的磷酸氢二钠-柠檬酸，磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液的pH值为6.0~8.5，全氟叔丁醇的体积为磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液的体积的15%~40%；

b₁、反应结束后，将反应混合物先经截留分子量4000~6000的超滤膜过滤，滤出液再经截留分子量150~250的超滤膜浓缩；

c₁、将经过超滤膜浓缩后的滤出液在25~35℃下真空蒸馏去除溶剂，残余液经冷冻干燥后得到半胱氨酸寡肽。

2.如权利要求1所述的酶催化制备半胱氨酸寡肽的方法，其特征是：步骤a₁中，所述蛋白酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶或者碱性蛋白酶中的一种。

3. 如权利要求1所述的酶催化制备半胱氨酸寡肽的方法，其特征是：步骤a₁中，所述搅拌速度为200~400 rpm。

4.如权利要求1所述的酶催化制备半胱氨酸寡肽的方法，其特征是：步骤c₁中，所述真空蒸馏时的真空度控制在0~10pa。

5.如权利要求1所述的酶催化制备半胱氨酸寡肽的方法，其特征是：步骤c₁中，所述冷冻干燥的温度控制在-45~-20℃，冷冻干燥的时间控制在5~10小时。

6.使用权利要求1至5任意一项所述的半胱氨酸寡肽的制备膜敷料的方法，其特征是该方法包括以下步骤：

a₂、在15~25 mL去离子水中加入20~30 g 的半胱氨酸寡肽、二缩水甘油基乙醚与磺胺嘧啶银，半胱氨酸寡肽、二缩水甘油基乙醚与磺胺嘧啶银的重量比为 (10~30):(1~5):1；

b₂、将混合物平涂于平板上形成厚度为0.08~0.12 cm的膜料，将膜料连同平板置于0~-20℃下冷藏4~10小时后取出；

c₂、在室温下解冻后用蒸馏水中浸洗2~4次，去除未反应二缩水甘油基乙醚，得到半胱氨酸寡肽膜敷料。