[发明专利]粪便菌群在制备治疗慢性乙型肝炎微生态制剂中的应用

说明书

粪便菌群在制备治疗慢性乙型肝炎微生态制剂中的应用，涉及肠道微生态技术领域。所述粪便菌群的移植方法：1)分离纯化健康供体粪便中的粪便菌群；2)将粪便菌群移植到患者的肠道内，重塑患者失衡的肠道菌群至平衡状态。所述粪便菌群可在制备治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎药物中的应用。可与其他抗病毒药物如恩替卡韦联合使用，只要它们不产生其他不利的作用，例如过敏反应。可在制备缓解慢性乙型肝炎患者疾病反应的药物、降低慢性乙型肝炎患者HBsAg含量的药物、调节慢性乙型肝炎患者免疫功能的药物、缓解或辅助治疗慢性乙型肝炎的保健食品、饮品、肠内营养制剂或者膳食补充剂中应用。

技术领域

本发明涉及肠道微生态技术领域，尤其是涉及粪便菌群及其移植方法与在制备治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎微生态制剂中的应用。

背景技术

慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B，CHB)是一种全球流行的HBV感染疾病，据估计目前全球有约20亿HBV感染者，2.5亿慢性乙肝感染者，若未得到有效治疗，可能发展为肝癌、肝硬化等终末期肝病并导致死亡。我国慢性乙肝疾病负担较为严重，据估算目前有7000余万乙肝病毒携带者，约2800万慢性乙型肝炎患者，因乙肝死亡的人数占全球的近50％。当前的乙肝治疗药物主要包括干扰素IFN及核苷类似物，但是随着抗病毒疗程的延长，药物的耐药率迅速增高。比如拉米夫定的5年耐药率超过70％，阿德福韦酯的5年耐药率超过20％。但随着新一代核苷或核苷酸类似物的上市，如恩替卡韦，耐药问题已不再是主要问题，更棘手的问题在于停药难。即使经过多年的抗病毒治疗，仍有超过七成的人无法实现HBeAg阳性转阴，而让HBeAg阴性的乙肝患者HBsAg滴度下降15％则更难，倘若不规范停药或治疗，将可能导致肝炎爆发。

最近的研究发现，肠道菌群在由HBV感染发展至慢性乙型肝炎、肝硬化及肝癌的过程中发挥着至关重要的作用。诸多肠道共生菌如Faecalibacterium prausnitzii,Enterococcus faecalis,Enterobacteriaceae,Bifidobacteria及产乳酸细菌(Lactobacillus,Pediococcus,Leuconostoc和Weissella)与HBV感染引发的疾病状态直接相关。一方面，肠道菌群代谢产生的氧化三甲胺、内毒素及肠道菌群代谢初级胆汁酸后产生的次级胆汁酸(脱氧胆酸)等会加剧肝脏炎症；另一方面，肝脏分泌的胆汁酸经肝脏门静脉达到肠道，其作为肠道菌群的营养物而起到调节肠道菌群结构的作用。与此同时，通过调节肠道菌群影响肠-肝轴进而影响慢性乙型肝炎患者的疾病状态则是可行的。如2016年发表在《Hepatology》杂志上的文章表明菌群移植辅助抗病毒药物可以实现HBeAg阳性患者的HBeAg转阴，这是国际上利用菌群移植治疗慢性乙型肝炎的首次报道。

菌群移植是将健康人粪便中的功能菌群微生态制剂移植至患者胃肠道内，重建具有正常功能的肠道菌群，以此治疗肠道内和肠道外疾病。目前国内外基础研究领域尚无利用菌群移植或其它微生态制剂治疗HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者的报道，如果通过临床治疗使这部分患者实现HBsAg滴度降低，将HBsAg滴度控制在较低水平甚至实现患者的HBsAg清除，将具有很强的临床意义。

发明内容

本发明的目的在于为了克服现有临床治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎药物，如恩替卡韦停药难的不足之处，提供一种粪便菌群及其移植方法以及在制备治疗慢性乙型肝炎微生态制剂中的应用。

所述粪便菌群的移植方法，包括以下步骤：

1)分离纯化健康供体粪便中的粪便菌群：取健康供体的粪便，溶解于0.9％NaCl溶液中制成粪水稀释，采用粪便分析前处理仪TG-01进行分离提取，提取后得到的菌液在4℃条件下离心后得到菌体，待用；

2)将粪便菌群移植到患者的肠道内，重塑患者失衡的肠道菌群至平衡状态。

在步骤1)中，所述健康供体是经过严格的情商、智商、心理及素质等问卷调查、粪便及血清学检查、宏基因组测序等质量控制得到的健康供体；