[发明专利]多系分化持续应激细胞的应用、治疗周围神经损伤药物及其制备方法在审
| 申请号： | 201910977582.1 | 申请日： | 2019-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN110693908A | 公开（公告）日： | 2020-01-17 |
| 发明（设计）人： | 陈罡;王晓冬;赵雅玉 | 申请（专利权）人： | 南通大学 |
| 主分类号： | A61K35/28 | 分类号： | A61K35/28;A61P25/02;C12N5/0775;C12N5/02 |
| 代理公司： | 11427 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 徐思波 |
| 地址： | 226019 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 应激细胞 周围神经损伤 分化 制备 细胞悬液 治疗 临床治疗 悬浮培养 分选 配制 应用 | ||
1.多系分化持续应激细胞在制备治疗周围神经损伤药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的多系分化持续应激细胞在制备治疗周围神经损伤药物中的应用，其特征在于，所述多系分化持续应激细胞来源于骨髓、脂肪、脐带或真皮的间充质组织。
3.一种用于治疗周围神经损伤药物，其特征在于，至少包括多系分化持续应激细胞的细胞悬液。
4.根据权利要求3所述的一种用于治疗周围神经损伤药物，其特征在于，所述多系分化持续应激细胞悬液的药物用量为多系分化持续应激细胞个数计数为5~10×106个/kg 体重，局部注射1~5次；或 5~10×107个/kg 体重，静脉输注1~5次。
5.一种根据权利要求3所述的用于治疗周围神经损伤药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）分选得到多系分化持续应激细胞；（2）对分选出的多系分化持续应激细胞进行悬浮培养；（3）配制多系分化持续应激细胞的细胞悬液。
6.根据权利要求5所述的一种用于治疗周围神经损伤药物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中多系分化持续应激细胞进行悬浮培养包括以下过程：使用a-MEM + 0.9％MethoCult H4100 + 20％FBS培养基，培养1天后细胞开始聚集，单个细胞聚集成团形成细胞集落，之后细胞集落又分裂生长，形成干细胞球，3-5天细胞数目逐渐增多，细胞球逐渐增大，呈现大而透亮的形态；多系分化持续应激细胞传代培养后的成球时间要比第1代细胞明显缩短，从第2代开始，第二天即可形成细胞球；采用多能干细胞标记物SSEA-3、Nanog、Oct4和Sox2 对多系分化持续应激细胞做鉴定。
7.根据权利要求5所述的一种用于治疗周围神经损伤药物的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中的多系分化持续应激细胞的细胞悬液按以下过程进行制备：将步骤（2）培养的多系分化持续应激细胞用0.25％trypsin-EDTA进行消化制成单细胞悬液，生理盐水洗涤后，再用生理盐水悬浮，得到多系分化持续应激细胞悬液。
8.根据权利要求5所述的一种用于治疗周围神经损伤药物的制备方法，其特征在于，所述多系分化持续应激细胞悬液中多系分化持续应激细胞的细胞浓度为1~10×107 个/ml。
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