[发明专利]具有生物活性的紫花苜蓿茎叶多糖及其硒化改性多糖的制备

说明书

具有生物活性的紫花苜蓿茎叶多糖及其硒化改性多糖的制备，涉及一种天然药物改性多糖的制备，首先从干燥的紫花苜蓿干草中得到水提浸膏，去蛋白，去色素后，经过阴离子交换柱层析分离，用去离子水和一系列梯度的NaCl溶液洗脱，收集得到3个新的紫花苜蓿多糖组分APS1﹑APS2和APS3，它们的分子量范围为8～20 KDa。对其中量大的APS2和APS3进行硒化修饰后得到新的硒化多糖Se‑APS2和Se‑APS3，它们的分子量范围为6～12 KDa。其中Se‑APS3的抗氧化活性最强。与APS2，APS3相比，硒化后得到的硒多糖具有明显的神经细胞保护活性。以上研究内容为多糖及其硒化产物的活性分析和抗衰老功能食品及阿尔茨海默等疾病的药品开发奠定了理论基础。

技术领域

本发明涉及一种天然药物改性多糖的制备，特别是涉及一种具有生物活性的紫花苜蓿茎叶多糖及其硒化改性多糖的制备。

背景技术

紫花苜蓿（Medicago sativa L.）是豆科苜蓿属，一种多年生的牧草，品质较好，牧草的质量优良，适应性强，无草本气味，可以在各种土壤和地形上生长，原产于伊朗、小亚细亚、外高加索等一带，现在全世界范围内都有非常广泛和丰富的栽培,有着“牧草之王”的称号。在民间，紫花苜蓿全草及根用于治疗菌痢、肠炎、肺热咳嗽、消化不良、黄疸、尿路结石等症状的疾病。

苜蓿多糖是一种从苜蓿的茎和叶中提取得到的天然多糖，已经被证明具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、保肝脏、抗炎的作用，还能提高生产畜产品的能力，而且对机体的不良反应非常小。因此，深度开发紫花苜蓿中多糖资源，并深入研究其药理活性和结构，对于紫花苜蓿的深加工及其在食品、工业、医药等领域的广泛应用，具有重大的经济和社会效益。

研究表明，对植物多糖进行硒化修饰后，会提高其生物活性或者增加新的活性，本研究采用硝酸-亚硒酸钠法对分离得到的苜蓿多糖进行硒化修饰，并对多糖硒化前后的抗氧化活性进行研究，结果表明紫花苜蓿茎叶多糖及其硒化改性多糖均有抗氧化活性，进一步对其神经细胞保护活性进行研究，结果表明硒化后的多糖具有一定的神经细胞保护活性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有生物活性的紫花苜蓿茎叶多糖及其硒化改性多糖的制备，本发明制备的多糖化和硒化多糖具有一定的抗氧化活性，而且硒多糖在天然多糖的基础上增加了神经细胞保护活性。为多糖的结构修饰，多糖的活性分析以及多糖抗衰老功能食品，神经细胞保护疾病有关的药物的开发奠定了理论基础。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

具有生物活性的紫花苜蓿茎叶多糖及其硒化改性多糖的制备，其制备过程包括取干燥的紫花苜蓿茎叶，依次用石油醚，乙醇回流提取去除脂和小分子后，加入蒸馏水加热回流2～6次，过滤，合并滤液，去蛋白，去色素后得到紫花苜蓿粗多糖；将得到的粗多糖经过阴离子交换柱层析分离，依次用蒸馏水﹑0.1～0.5 mol/L的NaCl溶液进行洗脱，用凝胶纯化后得到3个新的紫花苜蓿多糖APS1﹑APS2﹑APS3；

将上述得到的两个产量较大的多糖APS2和APS3用硝酸-亚硒酸钠(NA-SS)法进行硒化修饰得到2个新的硒多糖Se-APS2和Se-APS3。

所述的具有生物活性的紫花苜蓿茎叶多糖及其硒化改性多糖的制备，所述3个新的紫花苜蓿多糖，其结构片段分别为：APS1：2-O-acetyl-β-D-Manp-(1→3)-α-L-Araf-1(1→4)- α-L-Rhap-(1→，→3)- α-L-Rhap-(1→4)- α-L-Rhap-(1→；APS2：→3)-α-L-Rhap-(1→4)-α-L-Rhap-(1→，→3)-α-D-Galp-(1→4)-α-D-Galp-(1→，β-D-Manp-(1→2)-O-acetyl-β-D-Manp-(1→，β-D-Manp-(1→3)-α-L-Rhap-(1→；APS3：→3)-β-D-Fruf-(1→2)-α-D-Galp-(1→，α-D-Galp-(1→2)- α-L-Rhap-(1→，→3)-α-L-Araf-(1→3)- α-L-Rhap-(1→。