[发明专利]一种基质金属蛋白酶快速提取方法在审
申请号: | 201910969925.X | 申请日: | 2019-10-12 |
公开(公告)号: | CN110747189A | 公开(公告)日: | 2020-02-04 |
发明(设计)人: | 顾佳;葛行义;徐达;叶生宝 | 申请(专利权)人: | 南京立顶生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/64 | 分类号: | C12N9/64 |
代理公司: | 32320 南京禾易知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李海霞 |
地址: | 210000 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金属蛋白酶 履带式清洗机 细胞破碎 菌类 提取槽 提取液 基质金属蛋白酶 浆料输送 浆液输送 菌类提取 快速提取 研磨处理 离心机 研磨 内含物 切块机 珠磨机 切块 小块 淀粉 释放 | ||
1.一种基质金属蛋白酶快速提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:将含有金属蛋白酶的植物或菌类倒入履带式清洗机,由履带式清洗机输送至高速切块机切成小块,以方便后续的细胞破碎处理;
步骤2:将切块后的植物或菌类输送至珠磨机,进行研磨处理,使细胞破碎,释放出内含物;
步骤3:将研磨后的浆液输送至提取槽,在提取槽中倒入适量提取液,提取液为PH值7-9的水溶液,并在45-50摄氏度的环境下反应10-30分钟,以提取其中的金属蛋白酶;
步骤4:待反应完成后,将浆料输送至离心机,在离心力的作用下分离掉其中的淀粉;
步骤5:通过抽滤的方式将去除淀粉的浆料输送至超滤器,在抽滤的过程中,滤布能够过滤掉浆料中的酵母、霉菌、植物细胞等固形物,以达到粗滤的效果;
步骤6:将粗滤后的浆料送至超滤器,由超滤膜过滤掉剩余的生物大分子杂质,进行浓缩提纯处理;
步骤7:将处理完成的金属蛋白酶浓缩液送往真空冷冻干燥箱,以便长时间保存。
2.根据权利要求1所述的一种基质金属蛋白酶快速提取方法,其特征在于:所述步骤1中选用植物或菌类作为提取载体,和动物细胞相比,植物、菌类在提取时受声波、机械、渗透压、温度的敏感度较小,可以使金属蛋白酶的提取过程更加稳定。
3.根据权利要求1所述的一种基质金属蛋白酶快速提取方法,其特征在于:所述步骤2中的履带式清洗机上安装有若干喷头,能够在输送植物或菌类的同时对其进行清洗工作,去除表面杂质。
4.根据权利要求1所述的一种基质金属蛋白酶快速提取方法,其特征在于:所述步骤2中的珠磨机内部设置有若干玻璃小珠,在搅拌时与植物或菌类相互碰撞,剪切,使细胞破碎,从释放出内含物,破碎的过程中,应利用夹套冷却的方式将机器内部的温度控制在55摄氏度以下,避免金属蛋白酶大量失活。
5.根据权利要求1所述的一种基质金属蛋白酶快速提取方法,其特征在于:所述步骤3中采用PH值为7-9的水溶液作为提取液,是因为金属蛋白酶大多为中性蛋白质,最适PH值在7-9之间,在反应完成后能够使该PH范围外的蛋白酶失活,达到提取金属蛋白酶的效果,将温度控制在45-50摄氏度能够有效提高反应速度。
6.根据权利要求1所述的一种基质金属蛋白酶快速提取方法,其特征在于:所述步骤6中的超滤膜为高分子膜,截留颗粒大小在之间,故能有效过滤掉浆料中的生物大分子杂质,达到提纯的效果。
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