[发明专利]一种促皮肤愈合肽OA-GP11及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种促皮肤愈合肽OA‑GP11及其制备方法与应用。所述的促皮肤愈合肽OA‑GP11的氨基酸序列为GPLSGINAECM。本发明纯化得到的促皮肤愈合肽OA‑GP11在体外抗氧化活性检测、创伤修复细胞以及动物模型实验中显示了较强的活性，揭示本发明促皮肤愈合肽OA‑GP11有潜在的应用前景。本发明的有益效果在于：促皮肤愈合肽OA‑GP11具有结构简单、促创伤修复活性强的有益特点。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种促皮肤愈合肽OA-GP11及其制备方法与应用。

背景技术

作为人体最大的器官，皮肤可以调节体温并感知周围环境。它能保护体内组织和器官免受物理和化学伤害，以及来自致病微生物的侵害。皮肤的伤口修复过程是复杂和费时的，且任何修复过程的干扰都可能加重病情，并延迟伤口愈合。难治性的伤口也会导致病原体的入侵，导致继发感染、水和电解质紊乱、传染性休克、器官衰竭甚至死亡。为了改善康复过程，并减少在伤口愈合过程中出现的并发症，有效且快速地促进伤口愈合是至关重要的。目前，已知的几种创伤修复药物都存在一定的缺陷，包括稳定性差、活性低、存储成本高、疤痕增生等。因此，功能多样、活性高、稳定性高、特性专一的生物活性肽具有很高的探索价值。

两栖动物作为一种皮肤裸露且栖息地复杂的物种，很容易受到外部伤害，因而，它们形成了一种保护性的皮肤防御系统。之前关于两栖动物分泌物的研究已经确定了多种功能多样的生物活性肽，包括抗菌肽、抗氧化肽、伤口愈合肽、细胞因子、神经调节肽和神经毒素等。值得注意的是，两栖动物的皮肤在受损后可以迅速愈合，而且很少留疤，这表明了两栖动物皮肤分泌物中存在某种可以缩短伤口愈合的过程物质。

我们从云南臭蛙的皮肤分泌物中分离出一种新型肽，OA-GL17，它具有较高的抗氧化活性，可以有效促进体内外伤口的愈合，且具有较高的稳定性及促创伤修复活性。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种促皮肤愈合肽OA-GP11；第二目的在于提供所述的促皮肤愈合肽OA-GP11的制备方法；第三目的在于提供所述的促皮肤愈合肽OA-GP11的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的促皮肤愈合肽OA-GP11的氨基酸序列为GPLSGINAECM。

本发明的第二目的是这样实现的，包括以下步骤：

A、用电刺激法取云南臭蛙皮肤分泌物，溶解于PBS，真空冷冻干燥后得到物料a于-80℃保存备用；

B、将物料a溶解于水中得到物料b，物料b用Tris-HCl缓冲液进行洗脱，收集洗脱液得到物料c；

C、将物料c进行第一次高效液相色谱反相层析得到物料d；

D、将物料d进行第二次高效液相色谱反相层析得到目标物促皮肤愈合肽OA-GP11。

本发明的第三目的是这样实现的，所述的促皮肤愈合肽OA-GP11在制备促皮肤创伤修复的保健食品、化妆品或药品中的应用。

本发明是从云南臭蛙的皮肤分泌物中分离出一种新型肽，OA-GL17，它具有较高的抗氧化活性，可以有效促进体内外伤口的愈合，且具有较高的稳定性及促创伤修复活性。所述的OA-GL17具有结构简单、促创伤修复活性特点，可通过云南臭蛙皮肤分泌分离纯化得到的有益特点。本发明提供的促皮肤愈合肽OA-GP11，其制备方法可以通过生物化学分离纯化方法，由云南臭蛙皮肤分泌物中得到。上述方法制备的促皮肤愈合肽OA-GP11，可通过质谱及促创伤修复活性进行鉴定，促皮肤愈合肽OA-GP11的制备也可通过本领域常规的方法，采用化学合成或基因表达的方式得到。本发明纯化得到的促皮肤愈合肽OA-GP11在体外抗氧化活性检测、创伤修复细胞以及动物模型实验中显示了较强的活性，揭示本发明促皮肤愈合肽OA-GP11有潜在的应用前景。本发明的有益效果在于：促皮肤愈合肽OA-GP11具有结构简单、促创伤修复活性强的有益特点。

附图说明