[发明专利]利用土著微生物-植物联合去除磷矿废弃地中铅污染的方法

权利要求书

1.利用土著微生物-植物联合去除磷矿废弃地中铅污染的方法，其特征在于包括以下步骤：

(a)从铅污染的磷矿废弃地采集土壤样品，经富集、纯化和筛选，得到土著高效溶磷微生物；

(b)对土著高效溶磷微生物进行耐铅筛选及驯化培养，得到土著高效耐铅溶磷微生物；

(c)从铅污染的磷矿废弃地收集土著植物种子，将其置于含铅土壤中育苗，筛选得到土著铅富集植物；

(d)将土著铅富集植物栽种到铅污染的磷矿废弃地土壤中，接着将土著高效耐铅溶磷微生物接种到土著铅富集植物的根际土壤中，联合培养一段时间即可；

步骤(a)具体过程如下：将采集的土壤样品与无菌水按照100-200g:1L的比例混合均匀，过滤得到上清液；将上清液和溶磷微生物富集培养基按照1:3-5的比例混合，于28-35℃、120-170r/min转速下恒温摇床培养2-5天，富集得到土著溶磷微生物菌液；将富集得到的土著溶磷微生物菌液接种到溶磷微生物固体培养基中，于28-35℃倒置培养2-5天，得到混合土著溶磷微生物菌落；选择单一的菌落利用划线培养的方式于28-35℃纯化培养2-5天，得到纯化土著溶磷微生物菌株；将纯化土著溶磷微生物菌株接种至溶磷微生物筛选培养基中，在28-35℃、120-170r/min转速下振荡培养5-7天，比较培养液的可溶磷含量高低，最终确定土著高效溶磷微生物；所述溶磷微生物筛选培养基按照重量份数计的配方为：葡萄糖8-10份，(NH₄)₂SO₄ 0.3-0.6份，MgSO₄·7H₂O 0.05-0.2份，KCl0.1-0.3份，酵母浸粉0.4-0.6份，FeSO₄·7H₂O 0.02-0.04份，低品位磷矿粉0.8-1.2份，蒸馏水1000份，pH为6-7；所述低品位磷矿粉中五氧化二磷的含量为5％-20％，粒径为50-200目；

步骤(c)具体过程如下：调查铅污染的磷矿废弃地植物品种并取样，将采集到的植物种子播种到含蛭石的无铅土壤中，20-35℃育苗10-30天，选取发芽率高、生长状态好的植物幼苗移栽至试验花钵中，定时施浇铅含量为10-50mg/L的溶液，自然光照下生长30-60天后采样；分析检测植物体内的铅含量，确定生长状态良好且植物体内铅含量高的植物品种为土著铅富集植物；其中调查确定的铅污染的磷矿废弃地植物品种包括藜、黑麦草、苦苣、野菊、艾草、狗尾草，最终确定的铅富集植物为黑麦草、苦苣。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述溶磷微生物富集培养基按照重量份数计的配方为：葡萄糖8-10份，(NH₄)₂SO₄ 0.3-0.6份，MgSO₄·7H₂O 0.05-0.2份，KCl 0.1-0.3份，酵母浸粉0.4-0.6份，FeSO₄·7H₂O 0.02-0.04份，Ca₃(PO₄)₂0.8-1.2份，蒸馏水1000份，pH为6-7。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述溶磷微生物固体培养基按照重量份数计的配方为：葡萄糖8-10份，(NH₄)₂SO₄ 0.3-0.6份，MgSO₄·7H₂O 0.05-0.2份，KCl 0.1-0.3份，酵母浸粉0.4-0.6份，FeSO₄·7H₂O 0.02-0.04份，Ca₃(PO₄)₂0.8-1.2份，琼脂粉10-20份，蒸馏水1000份，pH为6-7。