[发明专利]一种干细胞外泌体补片及其制备方法

说明书

本发明公开了一种干细胞外泌体补片及其制备方法，其中干细胞外泌体补片包括补片基材，所述补片基材的上部设有隔离层，所述隔离层的上部设有干细胞的外泌体，所述干细胞的外泌体为干细胞分泌的分子直径为30‑100nm的亚细胞双层囊膜泡，本发明通过在补片基材的上部设置隔离层，并且采用聚(左旋乳酸‑己内酯)、聚氨酯和有机溶剂制取的电纺液，通过液体纺丝的方式制取补片基材，补片基材用多种方式使得补片基材被灭菌，防止了补片基材与人体生物不相容，防止了排异和并发症，相较于外泌体悬液的直接注射，补片作为良好载体将外泌体固定在一定部位，保障外泌体植入后的定点定向作用，大大降低外泌体流失的可能性。

技术领域

本发明涉及干细胞外泌体补片技术领域，具体为干细胞外泌体补片及其制备方法。

背景技术

相较于传统的直接注射细胞悬液的干细胞疗法，干细胞片移植的优势在于：①干细胞经过体外构建形成二维或三维的组织结构，在细胞片移植体内后仍能保持细胞与细胞间及细胞与胞质间的连接，有利于干细胞生物学活性的维持；②能使干细胞定向植入目的区域，不易流失，且在构建过程中人为控制细胞来源、种植密度、构建方法，大大促进细胞治疗的进程；③细胞片移植治疗可明显促进周围组织、细胞新生，对组织器官的损伤修复作用更为明显。

生物型补片是新世纪人类的再生系统，它能促使人体修复功能完成新组织的再生，生物补片植入人体后，起到很好的支撑作用，填补受缺损部位的缺失组织，并在该材料的诱导下，人体自身修复功能能够在原来的位置逐渐生长出新的组织，替换生物材料，完成器官组织再生的过程。

在现阶段临床上普遍使用的是人工合成的高分子材料补片，然而这些高分子材料补片多为不可吸收材料，与人体生物不相容，存在永久性异物反应，并伴随一系列并发症。

为此，我们推出一种干细胞外泌体补片及其制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种干细胞外泌体补片及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种干细胞外泌体补片，包括补片基材，所述补片基材的上部设有隔离层，所述隔离层的上部设有干细胞的外泌体，所述干细胞的外泌体为干细胞分泌的分子直径为30-100nm的亚细胞双层囊膜泡。

同时本发明还提供了一种干细胞外泌体补片的制备方法，包括如下步骤：

S1：制备电纺液：将聚(左旋乳酸-己内酯)和聚氨酯加入有机溶剂中，其中聚(左旋乳酸-己内酯)、聚氨酯和有机溶剂的质量比为6:2:92，搅拌溶解 1-3天，烧杯口用保鲜膜封闭，放置于恒温多磁头搅拌器搅拌溶解，搅拌速度 200-2000rpm，搅拌1-3天后得到电纺液；

S2：液体纺丝：将步骤S1制取的电纺液在高压静电动态纺纱装置中进行静电纺丝，所述高压静电动态纺纱装置包括：溶液储存装置、喷射装置、水浴装置和接收卷轴，静电纺丝的温度37-42℃，静电纺丝电压1-3kv，喷射装置输送溶液速度0.5-3ml/h，喷射装置中所需针头型号为8号，针头与水浴装置的距离为10-20cm，水浴装置中水的深度为5-40cm，水浴装置底部孔径为 0.1-1.5cm,水浴装置与接收卷轴之间的距离5-20cm，即得到补片基材；

S3：喷涂隔离层：将步骤S3中制取的补片基材从接收卷轴上取下，在补片基材上侧和下侧喷涂隔离层，所述隔离层为聚四氟乙烯、聚偏氟乙烯和乙烯聚四氟乙烯中的一种或几种，即得到喷涂隔离层后的补片基材；

S4：补片基材后处理：将步骤S3中取得的补片基材，放置于-80℃冰箱 2-12小时，取出后放入冷冻干燥机约24-48小时，温度为-(20-80)℃，压力为0.6-1.0MPa，冷冻干燥后的补片裁剪成长10cm、宽10cm；