[发明专利]一种栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法在审
申请号: | 201910906258.0 | 申请日: | 2019-09-24 |
公开(公告)号: | CN110554124A | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
发明(设计)人: | 方同华;闫久江;王喜军;韩冰;董丽丽 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨珍宝制药有限公司;黑龙江珍宝岛药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86 |
代理公司: | 11470 北京精金石知识产权代理有限公司 | 代理人: | 宋秀兰 |
地址: | 150000 黑龙江省哈*** | 国省代码: | 黑龙;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 栀子配方颗粒 指纹图谱 对照品溶液 供试品溶液 流动相 制备 高效液相色谱法 磷酸水溶液 甲醇溶解 梯度洗脱 对照品 栀子苷 质量控制 稀释 滤过 乙腈 | ||
1.一种栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,其包括如下步骤:
S1 对照品溶液的制备:取栀子苷对照品用甲醇溶解稀释,制成对照品溶液;
S2 供试品溶液的制备:取栀子配方颗粒,提取,滤过,取续滤液,即得供试品溶液;
S3 采用高效液相色谱法测得指纹图谱,其中流动相A为乙腈,流动相B为体积浓度为0.05-2%的磷酸水溶液,梯度洗脱。
2.根据权利要求1所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S1所述对照品溶液的浓度为0.01-10mg/mL。
3.根据权利要求1所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S3中所述高效液相色谱法的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;检测波长为238nm;梯度洗脱时间为90分钟;柱温为20-40℃;流速为每分钟1-3mL。
4.根据权利要求1所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S3中所述梯度洗脱为:0-24min,流动相A 5%,流动相B 95%;25-39min,流动相A 15%,流动相B 85%;40-79min,流动相A 20%,流动相B 80%;80-89min,流动相A 40%,流动相B 60%;90min,流动相A50%,流动相B 50%。
5.根据权利要求1所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,所述测定方法还包括如下步骤:
S4 将10-20批供试品的指纹图谱采用相对保留时间方式标定共有指纹峰,确定相对偏差大小生成对照图谱;
S5 将10-20批供试品的指纹图谱通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行相似度的比对,确定特征峰。
6.根据权利要求5所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S4中所述相对偏差不超过±3%。
7.根据权利要求5所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S5中所述特征峰有6个,峰号依次记为1-6,以6号峰栀子苷的特征峰为参比峰,出峰时间记为1min,其余各特征峰的相对保留时间分别为:0.41、0.48、0.53、0.69和0.84。
8.根据权利要求5所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S5中所述相似度≥0.998。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S2中所述提取是指向栀子配方颗粒中加入浓度为40-60%的甲醇水溶液后超声处理20-40分钟。
10.根据权利要求1-8中任一项所述的栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法,S3中高效液相色谱法色谱柱的规格为4.6mm×250mm,填料粒径4-6μm;进样量为5-20μL。
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