[发明专利]冻干PCR预混液的试剂

说明书

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，提供了一种冻干PCR预混液的试剂。本发明通过采用在PCR预混液中添加稳定处方实现PCR预混液的冻干，稳定处方组分简单，冻干成品成型良好，稳定期长，且稳定处方不影响PCR扩增效率。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，涉及一种冻干PCR预混液的试剂。

背景技术

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一种分子生物学技术，用于扩增特定的基因片段，目前该技术已在全世界范围内广泛应用，因其具有较高的灵敏度，优良的特异性，并且具有操作简便，快捷等优点，在生物和医学研究中起到了举足轻重的作用。

目前市场流通的用于基因检测的PCR试剂大部分为液体试剂，且扩增所需的各个组分通常需要分几管分装，常温储存并不稳定，需要进行超低温保存和运输，这就给储存和运输带来很大不便，同时试剂的效期短，在检测操作中增加了环境中气溶胶对扩增体系的污染风险。对此，将液体试剂混合冻干制备成冻干的PCR预混液进行保存为目前的一种改进方法。

市场上冻干的PCR预混液按照是否含有扩增引物分为两种，一种是冻干PCR扩增预混液，另外一种是冻干PCR酶预混液，其区别在于，前者为设计好的针对目的基因的全混检测试剂，直接加水复溶后，添加待检样本即可检测；而后者仅含有PCR扩增所需的酶，有的还含有扩增所需的底物，其可根据需求应用于各类目的基因的检测。目前冻干PCR预混液的冻干难点之一是稳定处方，稳定处方不仅需要保证冻干PCR预混液成型，保存期理想，更重要的是引入的处方不干扰、不破坏预混液各试剂的PCR扩增效率。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种用于冻干PCR预混液的稳定处方，以保证冻干PCR预混液成型，保存期理想，更重要的是引入的处方不干扰、不破坏预混液各试剂的PCR扩增效率。

本发明的第二目的在于提供一种冻干PCR预混液的方法。

本发明的第三目的在于提供冻干的PCR预混液，以缓解现有技术中冻干的PCR预混液相较于冻干前扩增效率差距大等问题。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种用于冻干PCR预混液的稳定处方，所述稳定处方包括如下a)-c)任一种组成：

a)氢化麦芽糖；

b)氢化麦芽糖和蜜里三糖；

c)氢化麦芽糖和蜜里三糖，以及，海藻糖、乳糖或蔗糖中的至少一种。

进一步地，所述氢化麦芽糖的使用终浓度为3-10w/v％，优选为5-10w/v％，进一步优选为6-10w/v％。

进一步地，所述蜜里三糖的使用终浓度为2-10w/v％，优选为6-10w/v％，进一步优选为7-10w/v％。

进一步地，所述海藻糖的使用终浓度为3-12w/v％，优选为6-12w/v％，进一步优选为7-11w/v％。

进一步地，所述乳糖的使用终浓度为0.3-3w/v％，优选为0.3-1w/v％，进一步优选为0.4-0.9w/v％。

进一步地，所述蔗糖的使用终浓度为2-9w/v％，优选为6-9w/v％，进一步优选为7-8w/v％。

进一步地，所述PCR预混液包括PCR扩增预混液或PCR酶预混液。

一种冻干PCR预混液的方法，在PCR预混液中加入稳定处方，经冻干得到冻干的PCR预混液。

上述方法制备得到的冻干的PCR预混液。

一种包括上述冻干的PCR预混液的试剂盒。