[发明专利]用于下呼吸道病原微生物检测的引物组合物有效
申请号: | 201910838932.6 | 申请日: | 2019-09-05 |
公开(公告)号: | CN110423835B | 公开(公告)日: | 2022-09-20 |
发明(设计)人: | 宋元林;陈翠翠;周建;李华茵;蒋进军;陈淑靖;侯东妮;张宇晔;张东辉;王葆青;周春妹;沈佳瑾;郭玮;王蓓丽;杨轶慧 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6869;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人: | 于晓菁 |
地址: | 200032 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 呼吸道 病原微生物 检测 引物 组合 | ||
本发明公开了一种用于下呼吸道病原微生物检测的引物组合物,该引物组合物包含SEQ NO:1‑SEQ NO:30的引物。本发明的引物组合物对下呼吸道病原微生物的检测具有检测通量高、特异性强、不易污染、安全性高的优点,检测结果具有较好的准确性和重复性,可以用于临床指导用药和治疗。
技术领域
本发明涉及微生物检测领域,具体的说涉及一种用于下呼吸道病原微生物检测的引物组合物。
技术背景
呼吸道感染是当今重要的全球性公共卫生问题,也是临床上最常见的感染性疾病。感染性病原体种类多样,主要包括病毒、细菌、衣原体、支原体等。它们传播迅速,不仅有较强的传染性,而且可引起严重的并发症甚至死亡。对致病病原体的识别和分析是治疗和防控的第一步,而单从临床表现很难区分感染性病原体,易造成误诊、贻误病情和抗生素滥用。因此对致病性病原体进行快速有效的检测和监控对于指导临床规范用药以及减少疾病传播有着深远意义。
目前临床上主要使用的鉴定病原体方法一般是依靠细菌培养法,这也是临床下呼吸道感染检测的金标准。然而这种涂片镜检、分离培养的方式,临床检出率低(分离培养阳性率仅40%~60%),周期长(2~5天),假阳性率高,迫使临床医生在没有病原学精确结果的情况下进行抗菌药物的经验性用药,这对于下呼吸道感染的精准治疗和细菌耐药性的控制都非常不利。
除了细菌培养之外,应用最为广泛的是呼吸道病原体免疫九联检。这一检测价格低廉,能覆盖细菌培养无法覆盖或检测效果差的一些常见病原体,检测速度相对较快。但是由于免疫法检测的是样本中病原体引起机体产生的特异性抗体,因此存在一个较长的空窗期,并且灵敏度相对较低。
在基因水平对下呼吸道病原微生物的检测方法主要有核酸杂交法、基因芯片法、PCR及其衍生技术法、宏基因组法等。基于PCR法的检测灵敏度高,时间短,但要达到多目标检测,充分覆盖临床可能致病病原体,就会增加成本。宏基因组高通量测序法在过去的数年中被广大科学家用于分析环境微生物宏基因组,近两年,这一方法作为一个新的微生物检测工具,开始被一些测序服务公司用于病原体诊断。该方法具有所有检测方法中最全面的检测覆盖范围,然而只能检测微生物的有无,无法对微生物诊疗相关的基因,且检测时间相对较长,无法检测病毒等RNA,易受污染,成本高。基因芯片法使分子检测走入了高通量检测时代,检测通量高,灵敏度高,检测速度相对较快;存在的不足是成本高,对一些序列突变导致的耐药无能为力,相对于测序检测平台,其定量性能差,稳定性弱。
综上所述,下呼吸道病原的检测方法多种多样,各种方法都有其优缺点,急需为临床提供灵敏度高、特异性强、耗时短、结果明确的病原体检验方案。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于下呼吸道病原微生物检测的引物组合物,该引物组合物包含SEQ NO:1-SEQ NO:30的引物;
这些引物以混合物形式溶解于水中,根据后续检测需要配制成所需的浓度;
所述的引物组合物可以同时检测15种下呼吸道病原微生物,这15种病原微生物为:肺炎链球菌、无乳链球菌、酿脓链球菌、金黄色酿脓葡萄球菌、结核杆菌复合群、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌属、隐球菌属、肠球菌属、肺炎支原体;
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