[发明专利]GC-MS分离测定对氨基水杨酸中相关杂质的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种GC‑MS分离测定对氨基水杨酸中相关杂质的方法和分离测定对氨基水杨酸中相关杂质的试剂组合物。所述杂质为硝基苯；所述方法以6％氰丙基苯基—94％二甲基聚硅氧烷为色谱柱固定液，采用液液萃取，即使用氢氧化钠溶液溶解对氨基水杨酸，采用二氯甲烷进行萃取；所述测定硝基苯的限度≤0.8ppm。所述方法消除了对氨基水杨酸的干扰，且操作简单、分离度好、专属性强、灵敏度高，能精准的确保对氨基水杨酸及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种GC-MS分离测定对氨基水杨酸中相关杂质的方法和分离测定对氨基水杨酸中相关杂质的试剂组合物。

背景技术

结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病，结核杆菌的中文学名为结核分枝杆菌(M.tuberculosis)。结核分枝杆菌细胞壁中含有脂质，脂质可防止菌体水分丢失，故对干燥的抵抗力特别强。粘附在尘埃上保持传染性8-10天，在干燥痰内可存活6-8个月。结核分枝杆菌可发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异。目前，结核病的治疗多采用利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素为第一线药物。利福平与异烟肼合用可以减少耐药性的产生。对严重感染，可以吡嗪酰胺与利福平及异烟肼合用，以减少耐药性的产生，增强疗效。

对氨基水杨酸化学名为4-氨基-2-羟基苯甲酸，熔点为135-145℃，是抗结核分枝杆菌的药物，对氨基水杨酸可以延缓结核分枝杆菌对异烟肼和链霉素耐药性的产生，其作用机制可能为抑制叶酸合成(但对抗叶酸化合物无增效作用)并/或抑制细胞壁分枝杆菌生长素的合成，使结核分枝杆菌的铁摄入减少，从而达到抑菌作用。对氨基水杨酸仅对分枝杆菌有效，单独应用时结核杆菌能迅速产生耐药性，因此本品必须与其他抗结核药合用。

而对氨基水杨酸中的杂质硝基苯属于2B类致癌物，虽然目前已有GC-MS检测硝基苯的方法，但是没有检测对氨基水杨酸中极低限度硝基苯(0.8ppm)的方法，因此急需提供一种灵敏度更高的GC-MS检测法来更精准的确保对氨基水杨酸及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种GC-MS分离测定对氨基水杨酸中相关杂质的方法，该方法能准确的分离检测对氨基水杨酸中的硝基苯，且操作简单、分离度好、专属性强、灵敏度高，能精准的确保对氨基水杨酸及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效。

为实现上述目的，本发明采用以下方案：

所述方法分离的杂质为硝基苯；所述方法以6％氰丙基苯基—94％二甲基聚硅氧烷为色谱柱固定液，采用液液萃取，即使用氢氧化钠溶液溶解对氨基水杨酸，采用二氯甲烷进行萃取；所述测定硝基苯的限度≤0.8ppm。

进一步，具体包括以下步骤：

1)配置内标溶液：取间硝基甲苯对照品，用二氯甲烷溶解并稀释得内标溶液；

2)配置供试品溶液：取供试样品，加入氢氧化钠水溶液溶解，再加入内标溶液混合均匀，静置，使分层，去掉上层溶液，在下层溶液中加入无水硫酸钠，振摇并静置，取上清液即得供试品溶液；

3)配置对照品溶液：取硝基苯对照品用内标溶液溶解并稀释后加入氢氧化钠水溶液溶解，振摇使混合均匀，静置，使分层，去除上层溶液，在下层中加入无水硫酸钠，振摇并静置，取上清液，即得对照品溶液；

4)分别取对照品溶液与供试品溶液进行GC-MS检测，记录色谱图。

进一步，所述内标溶液的浓度为40ng/ml。

具体实施例中，取间硝基甲苯对照品适量，用二氯甲烷溶解并定量稀释制成每1ml中约含40ng的溶液。

进一步，所述供试品溶液的浓度为50mg/ml。