[发明专利]出芽短梗霉菌PA-2发酵培养基及发酵条件优化方法

说明书

本发明提供了一种出芽短梗霉菌PA‑2发酵培养基及发酵条件优化方法，涉及菌株培养技术领域，能够有效增加对出芽短梗霉菌PA‑2进行发酵培养时的孢子数，提高生产效率；该培养基包括所述培养基包括：葡萄糖、大豆粉和无机盐；所述无机盐包括：NaCI、MgSO₄、KCI、K₂HPO₄和(NH₄)₂SO₄；葡萄糖为84.60g/L、大豆粉为46.35g/L以及无机盐为10.91g/L；发酵培养的条件为：pH值为7.0、发酵培养时间为120h、接种量为8％、转速为180r/min、发酵温度为25℃和装液量为60mL。本发明提供的技术方案适用于出芽短梗霉菌的培养过程中。

【技术领域】

本发明涉及菌株培养技术领域，尤其涉及一种出芽短梗霉菌PA-2发酵培养基及发酵条件优化方法。

【背景技术】

田间杂草是作物病虫害发生和传播的介质，增加了农业田间管理劳动和投入成本，成为严重危害农业经济的因素之一(李久新，2011；陈世国，2015；李香菊，2018)。化学农药的长期大量使用导致农田杂草抗药性迅猛发展，作物药害、农药残留发生频繁，增加了治理难度和人工费用(冯维卓，2001；梁巧玲，2007)。因此，为研究高效、新型、绿色、无污染的生物农药增加除草药剂的丰富度，避免单一药剂的长期使用造成杂草抗药性已成为当前杂草防除研究的热点。出芽短梗霉菌(Aureobasidium pullulans)是一类与酵母密切相关的真菌，由于该菌可产生能够抑制杂草和植物病害的代谢产物，进而达到防除作用，因此可被作为生防除草剂应用在杂草生防领域。

目前，出芽短梗霉菌的生产主要通过发酵培养基进行发酵培养的方式。在不同生境中发现的出芽短梗霉菌对于生长条件和环境要求各有不同，优化适合特定菌株的发酵条件是研究利用该菌株的重要基础。不同学者采用单因素和正交优化设计以及Box-Benhnken中心组合设计分别对出芽短梗霉菌的不同菌株液体发酵条件进行优化，提高了发酵水平，缩短了发酵周期，为后续的工业生产奠定了基础。但是，现阶段对出芽短梗霉菌的研究以发酵产生糖类物质和提高发酵液活性物质为主要方向，对提高孢子数量的研究几乎没有，不能满足出芽短梗霉菌日益广泛的应用要求。

因此，有必要研究一种出芽短梗霉菌PA-2发酵培养基及发酵条件优化方法提高孢子数量来应对现有技术的不足，以解决或减轻上述一个或多个问题。

【发明内容】

有鉴于此，本发明提供了一种出芽短梗霉菌PA-2发酵培养基及发酵条件优化方法，能够有效增加对出芽短梗霉菌PA-2进行发酵培养时的孢子数，提高生产效率。

一方面，本发明提供一种出芽短梗霉菌PA-2发酵培养基，其特征在于，所述培养基包括：葡萄糖、大豆粉和无机盐；

所述无机盐包括：NaCI、MgSO₄、KCI、K₂HPO₄和(NH₄)₂SO₄。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，所述培养基各成分的量为：葡萄糖为84.60g/L、大豆粉为46.35g/L以及无机盐为10.91g/L。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，所述无机盐的各成分的量为：NaCI为2.59g/L、MgSO₄为0.52g/L、KCI为0.78g/L、K₂HPO₄为6.50g/L以及(NH₄)₂SO₄为0.52g/L。

如上所述的方面和任一可能的实现方式，进一步提供一种实现方式，所述培养基对出芽短梗霉菌PA-2进行发酵培养时产孢量的理论最高值为12.76×10⁸CFU/mL。