[发明专利]一种mRNA疫苗递送载体及其制备方法

说明书

本发明提供了一种mRNA疫苗递送载体，所述mRNA疫苗递送载体为类脂聚合物，所述类脂聚合物由PAMAM树枝状聚合物与1,2‑环氧十二烷反应制得。本发明还提供了该mRNA疫苗递送载体的制备方法。本发明提供的mRNA疫苗递送载体特异性好、稳定性好、效率高、毒性低、安全有效。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种mRNA疫苗递送载体及其制备方法。

背景技术

近年来，包括肿瘤疫苗在内的肿瘤免疫疗法在改变肿瘤治疗和肿瘤生物学的方面取得了突破。治疗性疫苗在治疗多种类型的肿瘤和传染病方面显示出巨大的潜力。在肿瘤疫苗的发展中，抗原通常以蛋白质多肽和DNA质粒的形式作为疫苗的主要组成部分被用作传统疫苗的开发；而今，基于mRNA(messenger RNA，信使RNA)形式的抗原的疫苗治疗方法也逐步得到应用，并成为常规疫苗策略的有力替代品。多肽抗原合成成本较高，耗时较长；而DNA 抗原表达效率不高，而且有造成基因突变的风险。而mRNA形式的抗原不仅可以在非分裂以及难以转染的细胞如树突状细胞中实现快速的蛋白质表达，并且其免疫原性可以通过化学修饰调节。由于以mRNA为基础的疫苗具有作用高效快速、安全性高以及制备成本较低等特点，因此与基于蛋白短肽和质粒DNA的疫苗相比具有更大的发展潜力与优势。目前，在许多基础研究和临床试验中，mRNA疫苗的细胞内递送已显示出可诱导编码抗原蛋白质合成和加工递呈并激活T细胞，从而发挥高效率的抗肿瘤免疫反应的作用。

在过去几年中，体外转录mRNA已成为用于递送遗传信息的潜在新型药物。无修饰及递送载体的裸露mRNA注射具有快速且成本低的特点，但由于mRNA自身带高负电荷、易降解、稳定性差等特点，mRNA的体内递送仍面临若干潜在挑战。目前主要的mRNA体内递送手段是利用鱼精蛋白或者纳米脂质体来提高mRNA的稳定性和刺激抗原的提呈。然而鱼精蛋白包裹mRNA还没有用于肿瘤疫苗，其用于治疗自身免疫疾病的产品目前正在临床试验；而纳米脂质体用于mRNA肿瘤疫苗体内递送需要淋巴结注射，对临床操作难度较高，其治疗效果也还有待临床试验的验证。因此，mRNA肿瘤疫苗的临床应用前景虽然光明，但是如何稳定安全的实现mRNA疫苗在体内的表达和激活免疫反应仍然是一个技术难题。

有效的mRNA肿瘤疫苗需要克服稳定性差、效率有限、毒性高和成本高等问题，实现mRNA的有效递送及编码抗原的高效表达，从而引起特异性的抗肿瘤免疫反应。作为一种全新的治疗方法，肿瘤纳米疫苗的一个优势是可以实现同时递送肿瘤抗原及免疫佐剂。随着纳米医学的发展，许多纳米工程制剂，包括基于聚合物的纳米材料和基于脂质体的纳米材料，已经设计用于在体内递送siRNA(small interfering RNA，小干扰RNA)或其他小寡核苷酸，但用于mRNA疫苗递送的材料还非常有限。由于mRNA的结构及自身物理化学特征，现有的纳米材料对于mRNA递送仍不够有效，以mRNA为基础的肿瘤疫苗的发展与临床应用仍面临许多问题。

发明内容

本发明的目的是针对以上要解决的技术问题，提供一种能够稳定性好、效率高、毒性低、安全有效的mRNA疫苗递送载体。

本发明的另一个目的是提供所述mRNA疫苗递送载体的制备方法。

本发明的另一个目的是提供一种mRNA疫苗。

本发明的另一个目的是提供所述mRNA疫苗的制备方法。

为此，本发明提供了一种mRNA疫苗递送载体，该mRNA疫苗递送载体为类脂聚合物，所述类脂聚合物由PAMAM树枝状聚合物(poly(amidoamine)(PAMAM)dendrimers)与1,2- 环氧十二烷反应制得。

优选地，所述PAMAM树枝状聚合物与1,2-环氧十二烷的摩尔比为1:5。

本发明还提供了所述mRNA疫苗递送载体的制备方法，包括以下步骤：