[发明专利]一种含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法

说明书

本发明公开了一种含PF127的丝素载药纳米粒子及其制备方法和应用，涉及纳米药物载体技术领域；本发明的丝素蛋白纳米粒子作为一种全新的纳米粒子，其具有均一的粒径、优良的生物相容性、生物可降解以及粘膜穿透能力；以生物相容性能优良的天然蚕丝为原材料，保证纳米载体的生物安全性能，并且整个制备方法及制备过程简单快捷，蚕丝来源广泛，纳米粒子制备周期短，产率高，操作方便，对环境友好；通过将丝素蛋白用去溶剂化法自组装制备纳米粒子，对RSV起到了保护作用，改善了RSV水溶性不佳、不稳定、易分解、组织分布差、生物利用度低等问题，更好的把RSV递送到病患部位发挥作用，增加疗效。

技术领域

本发明涉及纳米药物载体技术领域，具体是一种含PF127的丝素载药纳米粒子及其制备方法和应用。

背景技术

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis, UC)是一种由多种病因引起的、特发的、异常免疫介导的、反复发作的肠道慢性炎症性疾病，临床上主要表现为反复发作的腹痛、腹泻、粘液脓血便、里急后重等一系列的症状。病变位于大肠，呈连续性弥漫性分布，多数累及直肠和乙状结肠，有时遍及整个结肠。UC具有机型暴发型病死率高、慢性持续型癌变率高、易反复发作等特点，且目前无特效药物，故被世界卫生组织列为现代难治病之一。本病在欧美国家发病率较高，在国内未见精确的统计报告数据，但近年来呈明显增加的趋势。因此，UC的治疗变得非常重要。目前，UC治疗的药物包括免疫调节剂和抗炎药。一些药物对炎症是有效的，但由于其依赖性、高复发率和毒性而无法维持。UC治疗的目的是诱导和维持缓解，减少复发，提高患者的生活质量。

白藜芦醇（Resveratrol，RSV）是一类主要存在于葡萄、藜芦、虎杖等植物中的多酚类化合物，现有的文献已证实RSV具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗癌、调节血脂等重要作用。2016年，Maryam等人将RSV作为补充剂治疗临床UC病人，随机实验发现RSV有很好的抗氧化和抗炎症作用，能够有效的缓解病情，提高病人的生活质量。近10年来，由于RSVV特殊的生物火星，它在UC治疗中的作用引起了广泛的关注。RSV治疗UC的作用包括抗氧化和抗炎症两个方面。但由于RSV存在水溶性低、稳定性差、在体内代谢迅速等缺陷，其生物效应大大受限。而利用纳米输送系统包埋RSV可以很好的解决上述问题，提高RSV的生物利用度。

普朗克尼F-127（PF127）是一种聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯构成的非离子式三嵌段共聚物，具有粘液穿透能力，被用于口服纳米药物递送中克服粘液对口服药物吸收的障碍。丝素蛋白是一种性能优良的生物大分子，具有良好的透氧性、幺五升头型、无毒性、无刺激性，具有良好的生物相容性和生物降解性等生物医学方面的性能，已经被FDA批准可应用于医疗设备。本研究利用丝素良好的生物学特性作为材料，将疏水性药物RSV包裹在其内，同时引入具有粘液穿透能力的PF127，不仅解决了RSV溶解性差、稳定性差等缺点，还进一步提高了RSV在结肠炎患病结肠部位的粘液穿透能力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含PF127的丝素载药纳米粒子及其制备方法和应用，以解决上述问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：

1）将蚕茧经弱碱溶液脱胶后，用三元溶液完全溶解，再经去离子水透析后得到再生丝素蛋白；

2）将再生丝素蛋白溶解于二次水中，室温水化，得到水化后的再生丝素蛋白；

3）称取PF127，溶于水化后的再生丝素蛋白，得到混合溶液；

4）称取RSV，溶于丙酮中，得到溶有RSV的丙酮溶液；

5）在涡旋条件下将混合溶液滴加到溶有RSV的丙酮溶液中，得到乳浊液，其中水化后的再生丝素蛋白与溶有RSV的丙酮溶液的体积比为1:5；