[发明专利]一种含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法

权利要求书

1.一种含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将蚕茧经弱碱溶液脱胶后，用三元溶液完全溶解，再经去离子水透析后得到再生丝素蛋白；

将再生丝素蛋白溶解于二次水中，室温水化，得到水化后的再生丝素蛋白；

称取PF127，溶于水化后的再生丝素蛋白，得到混合溶液；

称取RSV，溶于丙酮中，得到溶有RSV的丙酮溶液；

在涡旋条件下将混合溶液滴加到溶有RSV的丙酮溶液中，得到乳浊液，其中水化后的再生丝素蛋白与溶有RSV的丙酮溶液的体积比为1:5；

将乳浊液涡旋1min后放入冰浴中，超声处理1min，然后去除乳浊液中的有机溶剂丙酮；

将去除了有机溶剂丙酮的乳浊液进行低速离心，弃掉上清液，收集沉淀；

将沉淀重悬于二次水中，超声处理1min，低速离心10min，收集上清液，重复三次，合并多次上清液；

对合并后的上清液进行高速离心，收集纳米粒子，然后用二次水洗涤三次；

10）将洗涤后的纳米粒子分散到含海藻糖的水溶液中，然后进行冷冻干燥，将纳米粒子存于-20℃的冰箱中备用，二次水与海藻糖溶液体积比为1:1。

2.根据权利要求1所述的含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中三元溶液由二次水、无水乙醇和氯化钙按照体积比8:2:1混合而成。

3.根据权利要求1所述的含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤4）中溶有RSV的丙酮溶液中RSV的浓度为0.1mg/ml。

4.根据权利要求1所述的含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤6）中去除乳浊液中的有机溶剂丙酮的方法为：将乳浊液旋转蒸发30min，然后在通风柜中搅拌3h。

5.根据权利要求1所述的含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤6）和步骤8）中超声振幅为30%，每次2s，间隔2s。

6.根据权利要求1所述的含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤7）和步骤8）中低速离心速率为6000rpm。

7.根据权利要求1所述的含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤9）中高速离心速率为13000rpm。

8.根据权利要求1所述的含PF127的丝素载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤10）中冷冻干燥的方法为：在-80℃冷冻过夜后置于冻干机中冻干12～24h。

9.一种利用如权利要求1-8任一所述方法制备的丝素载药纳米粒子，其特征在于，所述PF127的质量为再生丝素蛋白的1%、5%、10%或20%。

10.如权利要求9所述的丝素载药纳米粒子在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。