[发明专利]一种白鳍鲨的MsrA基因、蛋白质与基因提取的方法有效
申请号: | 201910735255.5 | 申请日: | 2019-08-09 |
公开(公告)号: | CN110551731B | 公开(公告)日: | 2023-04-14 |
发明(设计)人: | 王勇;程思明;孙艳梅;倪嘉缵 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/10;C07K14/46 |
代理公司: | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人: | 王永文;孙果 |
地址: | 518060 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白鳍鲨 msra 基因 蛋白质 提取 方法 | ||
1.一种白鳍鲨的MsrA基因,其特征在于,所述MsrA基因的核苷酸序列如序列表中的SEQID No:1所示。
2.根据权利要求1所述的白鳍鲨的MsrA基因,其特征在于,所述白鳍鲨的MsrA cDNA全长为1207bp。
3.根据权利要求1所述的白鳍鲨的MsrA基因,其特征在于,所述白鳍鲨的MsrA基因中,5’UTR为20bp,带有Ploy A尾巴的3’UTR长503bp,ORF为684bp。
4.根据权利要求1所述的白鳍鲨的MsrA基因,其特征在于,所述白鳍鲨的MsrA基因编码227个氨基酸。
5.一种表达权利要求1所述白鳍鲨的MsrA基因的蛋白质,其特征在于,所述蛋白质的氨基酸序列如序列表中的SEQ ID No:2所示。
6.一种如权利要求1所述的白鳍鲨的MsrA基因提取方法,其特征在于,包括步骤:根据白鳍鲨肝脏总蛋白质谱分析所得的肽段,设计上下游简并引物,进行cDNA克隆,通过3’RACE和5’RACE法来获得两末端序列,并将得到的序列进行拼接,得到白鳍鲨的MsrA基因。
7.根据权利要求6所述的白鳍鲨的MsrA基因提取方法,其特征在于,具体包括步骤:
从白鳍鲨的肝脏组织中提取总RNA;
以所述总RNA为模板进行反转录获得cDNA;
设计上下游简并引物,以获得的cDNA为模板,进行PCR扩增,得到扩增产物;
将得到的扩增产物进行序列测定,将测定结果进行核酸BLAST比对,得到白鳍鲨的MsrA基因片段;
通过3’RACE和5’RACE法获得MsrA基因的两末端序列,将得到的序列进行拼接,得到白鳍鲨的MsrA基因。
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