[发明专利]适配体功能材料及其制备方法和在AFs检测中的应用在审
| 申请号: | 201910733789.4 | 申请日: | 2019-08-09 |
| 公开(公告)号: | CN110592091A | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
| 发明(设计)人: | 吴凤琪;岳振峰;张毅;吴绍精 | 申请(专利权)人: | 深圳市检验检疫科学研究院;深圳海关食品检验检疫技术中心 |
| 主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36;G01N30/34;G01N30/72 |
| 代理公司: | 44414 深圳中一联合知识产权代理有限公司 | 代理人: | 方良 |
| 地址: | 518000 广东省深圳市福*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 功能材料 羧基微球 适配体 氨基 检测技术领域 特异性识别 霉菌毒素 吸附容量 吸附稳定 酰胺键 检测 羧基 制备 应用 分析 | ||
1.一种适配体功能材料,其特征在于,所述适配体功能材料包括:
羧基微球以及结合在所述羧基微球表面的5’-NH2-Biotin-T18-22-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3’;其中,所述羧基微球表面的羧基与氨基形成酰胺键,T18-22为18-22个T碱基。
2.如权利要求1所述的适配体功能材料,其特征在于,所述适配体功能材料为羧基微球以及结合在所述羧基微球表面的5’-NH2-Biotin-T20-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3’。
3.一种适配体功能材料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
提供羧基微球,将所述羧基微球分散于缓冲液中,得到羧基微球分散液;
在所述羧基微球分散液中加入NHS和EDC进行羧基活化,得到中间体;
将5’-NH2-Biotin-T18-22-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3’与所述中间体混合,进行酰胺化反应,得到适配体功能材料。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,将5’-NH2-Biotin-T18-22-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3’与所述中间混合的步骤中,T18-22选为T20。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述缓冲液为PBS缓冲液,且所述缓冲液的pH=5.5。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述酰胺化反应的时间为0.5-1h。
7.一种权利要求1或2所述的适配体功能材料和/或权利要求3-6任一项所述的制备方法制得的适配体功能材料在AFs检测中的应用。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述AFs选自AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2中的至少一种。
9.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述AFs检测包括如下步骤:
提供AFs样品溶液;
将所述适配体功能材料装入固相萃取柱中,然后将所述AFs样品溶液流经所述固相萃柱,进行吸附处理;
将吸附处理后的固相萃取柱进行洗脱处理,经色谱-质谱分析,检测AFs含量。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述色谱-质谱分析为超高效液相色谱-串联质谱分析;其中,
色谱条件包括:色谱柱为Thermo Hypersll GOLD C18,流动相A为5mmol/L醋酸铵水溶液(含0.1%甲酸),流动相B为乙腈:甲醇(v/v,1:1),流速为0.3mL/min,进样量为5μL,柱温为40℃;和/或,
质谱条件包括:离子源为可加热的电喷雾离子源,扫描模式为正离子模式,喷雾电压为3.0kV,气化温度为400℃,离子传输管温度为300℃,鞘气流速为40L/min,辅助气流速为10L/min。
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