[发明专利]一种抑制卵巢癌细胞增殖的方法

说明书

本发明公开了一种抑制卵巢癌细胞增殖的方法。该方法为利用CRISPR/Cas9系统对卵巢癌细胞(细胞株SKOV3或细胞株A2780)基因组中的ATAD2基因进行编辑，进而使ATAD2蛋白的表达量和/或活性降低；CRISPR/Cas9系统包括sgRNA1和sgRNA2，sgRNA1识别的靶位点为序列表中序列1所示的DNA分子；sgRNA2识别的靶位点为序列表中序列2所示的DNA分子。实验证明，与对照卵巢癌细胞相比，敲除ATAD2基因的卵巢癌细胞的增殖能力、生长能力和克隆形成能力均显著降低，这对卵巢癌的治疗具有重要意义。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抑制卵巢癌细胞增殖的方法。

背景技术

卵巢癌是女性生殖系统的肿瘤，占女性所有恶性肿瘤发病率的2.5％，但由于存活率低，其死亡率占女性癌症死亡的5％。据估计，2018年美国有22，240例新确诊的卵巢癌病例和14，070例卵巢癌死亡病例。尽管手术技术和辅助疗法取得了一定进步，但卵巢癌的生存率几乎没有改变。因此，迫切需要发现更精确的致癌机制，并开发新的有效治疗方法，以提高卵巢癌患者的生存情况。

目前控制卵巢癌细胞生长的主要方法包括手术治疗和化疗。手术是治疗早期卵巢癌最有效的方法，但是对于病程发展迅速或者发现较晚的病人来说，往往会失去手术机会。对于这些病人，化疗是目前最主要的治疗方法，其中上皮性卵巢癌的化疗以TP(紫杉醇、卡铂/顺铂)、PC(顺铂、环磷酰胺)和PAC(顺铂、阿霉素、环磷酰胺)方案作为一线方案，恶性生殖细胞肿瘤及性索间质肿瘤可用PEB(顺铂、依托泊苷、平阳霉素)、PVB(顺铂、长春新碱、平阳霉素)、VAC(长春新碱、放线菌素D、环磷酰胺)方案作为一线方案。化疗面临的最大问题就是化疗耐药，耐药后化疗药物就很难再控制肿瘤的增殖生长。卵巢癌耐药已成为目前困扰临床治疗的主要问题之一，耐药型和难治型卵巢癌对再次治疗的反应率很低，仅为10-15％，治疗效果很不理想，目前只能采用姑息性治疗方案，以缓解症状为主。

对于卵巢癌细胞增殖能力强、恶性程度高、肿瘤生长速度快和病程进展快的卵巢癌，常常导致病人失去手术机会，生存时间更短。因此，抑制卵巢癌细胞的增殖有利于更好的控制肿瘤进展。

ATAD2蛋白(ATPase family AAA domain-containing protein 2)是ATPase家族的成员之一，是一个新发现的致癌蛋白。ATAD2蛋白包含两个保守域：一个负责组蛋白结合的bromodomain结构域和一个在调节ATP酶活性和蛋白多聚中起重要作用的ATPase结构域。编码ATAD2蛋白的基因(即ATAD2基因)定位于8q24.13号染色体。

发明内容

本发明的目的是抑制卵巢癌细胞的增殖。

本发明首先保护A1)或A2)或A3)。

A1)抑制ATAD2蛋白活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能可为如下b1)-b10)中的至少一种；b1)治疗卵巢癌；b2)预防卵巢癌；b3)抑制卵巢癌细胞的增殖；b4)抑制卵巢癌细胞的生长；b5)抑制卵巢癌细胞的克隆形成；b6)抑制MAPK通路；b7)抑制JNK-MAPK通路；b8)降低JNK的磷酸化水平；b9)降低ERK的磷酸化水平；b10)降低p-38的磷酸化水平。

A2)抑制ATAD2蛋白活性和/或表达量的物质的应用，可为如下b1)-b10)中的至少一种；b1)治疗卵巢癌；b2)预防卵巢癌；b3)抑制卵巢癌细胞的增殖；b4)抑制卵巢癌细胞的生长；b5)抑制卵巢癌细胞的克隆形成；b6)抑制MAPK通路；b7)抑制JNK-MAPK通路；b8)降低JNK的磷酸化水平；b9)降低ERK的磷酸化水平；b10)降低p-38的磷酸化水平。