[发明专利]一种抑制卵巢癌细胞增殖的方法

权利要求书

1.A1)或A2)或A3)：

A1)抑制ATAD2蛋白活性和/或表达量的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为如下b1)-b10)中的至少一种；

A2)抑制ATAD2蛋白活性和/或表达量的物质的应用，为如下b1)-b10)中的至少一种；

A3)抑制MAPK通路和/或抑制JNK-MAPK通路和/或降低JNK的磷酸化水平和/或降低ERK的磷酸化水平和/或降低p-38的磷酸化水平的物质的应用，为如下b1)-b5)中的至少一种；

b1)治疗卵巢癌；b2)预防卵巢癌；b3)抑制卵巢癌细胞的增殖；b4)抑制卵巢癌细胞的生长；b5)抑制卵巢癌细胞的克隆形成；b6)抑制MAPK通路；b7)抑制JNK-MAPK通路；b8)降低JNK的磷酸化水平；b9)降低ERK的磷酸化水平；b10)降低p-38的磷酸化水平。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述“抑制ATAD2蛋白活性和/或表达量的物质”或所述“抑制MAPK通路和/或抑制JNK-MAPK通路和/或降低JNK的磷酸化水平和/或降低ERK的磷酸化水平和/或降低p-38的磷酸化水平的物质”可包括sgRNA1和sgRNA2；sgRNA1识别的靶位点为序列表中序列1所示的DNA分子；sgRNA2识别的靶位点为序列表中序列2所示的DNA分子。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述“抑制ATAD2蛋白活性和/或表达量的物质”或所述“抑制MAPK通路和/或抑制JNK-MAPK通路和/或降低JNK的磷酸化水平和/或降低ERK的磷酸化水平和/或降低p-38的磷酸化水平的物质”还可包括Cas9蛋白。

4.B1)或B2)：

B1)ATAD2蛋白的应用，为如下a1)-a8)中的至少一种；

B2)ATAD2蛋白在制备产品中的应用；所述产品的功能为如下a1)-a8)中的至少一种；

a1)促进卵巢癌细胞的增殖；a2)促进卵巢癌细胞的生长；a3)促进卵巢癌细胞的克隆形成；a4)激活MAPK通路；a5)激活JNK-MAPK通路；a6)提高JNK的磷酸化水平；a7)提高ERK的磷酸化水平；a8)提高p-38的磷酸化水平。

5.方法S1)或方法S2)：

方法S1)一种抑制卵巢癌细胞增殖和/或生长和/或克隆形成的方法，为降低卵巢癌细胞中ATAD2蛋白的表达量和/或活性；

方法S2)一种抑制MAPK通路的方法，为降低卵巢癌细胞中ATAD2蛋白的表达量和/或活性。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述“降低卵巢癌细胞中ATAD2蛋白的表达量和/或活性”为利用CRISPR/Cas9系统对卵巢癌细胞基因组中的ATAD2基因进行编辑，进而使ATAD2蛋白的表达量和/或活性降低。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述CRISPR/Cas9系统包括sgRNA1和sgRNA2；sgRNA1识别的靶位点为序列表中序列1所示的DNA分子；sgRNA2识别的靶位点为序列表中序列2所示的DNA分子。

8.如权利要求6或7所述的方法，其特征在于：所述编辑的方法包括如下步骤：

(1)用含有sgRNA1的编码基因的重组慢病毒载体甲、含有sgRNA2的编码基因的重组慢病毒载体乙和慢病毒包装质粒转染慢病毒包装细胞，进行培养，获得重组慢病毒；

(2)将所述重组慢病毒感染卵巢癌细胞。

9.权利要求6至8中任一所述CRISPR/Cas9系统和/或所述重组慢病毒载体甲和/或所述重组慢病毒载体乙。

10.D1)或D2)：

D1)权利要求6至8中任一所述CRISPR/Cas9系统和/或所述重组慢病毒载体甲和/或所述重组慢病毒载体乙在抑制卵巢癌细胞增殖和/或生长和/或克隆形成中的应用；

D2)权利要求6至8中任一所述CRISPR/Cas9系统和/或所述重组慢病毒载体甲和/或所述重组慢病毒载体乙在抑制MAPK通路中的应用。