[发明专利]一种高抗氧化能力的功能型水稻制备方法

说明书

本发明公开一种高抗氧化能力的功能型水稻制备方法，是将膜荚黄芪与受体水稻进行远缘杂交，使受体水稻中控制花青素含量的Rc和Rd基因发生突变，从而增加了花青素含量，本发明提供的一种高抗氧化能力的功能型水稻制备方法，操作简单，成本低，将膜荚黄芪与水稻进行远缘杂交，制得的功能型水稻，经测试，原花青素含量和抗氧化活性能力均显著高于受体水稻，从而丰富了水稻的品种，提高了水稻的营养价值。

技术领域

本发明属于植物遗传育种领域技术领域，具体涉及一种高抗氧化能力的功能型水稻制备方法。

背景技术

水稻是主要的粮食作物，对人们的营养及身体健康至关重要。“功能型水稻”主要指在胚乳、胚和米糠等部分中所含的有效活性物质，具有调节各种人体生理代谢、满足不同消费群和特殊消费群需求的专用和保健水稻。开展各种专用型和保健型水稻的选育和应用研究，如红米和黑米，对于预防多种疾病、增强人们的体质起到积极作用，具有广泛的市场前景。然而水稻经长期进化后所具有的遗传基础或基因库有限，现有的常规水稻种质资源，难以满足人们对多种功能型水稻育种的需求。

膜荚黄芪是一种中药，具有补气升阳，益卫固表，利水消肿，托疮生肌等作用，药用价值极高，在我国有大面积的种植和培养。

远缘杂交是创造新物种、新类型、新品种的重要手段，也是改良现有作物品种的重要途径之一。现有技术中尚未有将膜荚黄芪与水稻进行远缘杂交。

发明内容

本项目的目的是基于远缘杂交，将膜荚黄芪与水稻进行杂交，从中创制出高抗氧化活性的功能型水稻，即“黄芪稻”。

本发明是通过以下技术方案实现的。

高抗氧化能力的功能型水稻制备方法，将膜荚黄芪与受体水稻进行远缘杂交，使受体水稻中控制花青素含量的Rc和Rd基因发生突变。

具体地，将膜荚黄芪与受体水稻进行远缘杂交的具体操作为：

(1)膜荚黄芪与受体水稻进行远缘杂交：将受体水稻剪颖、去雄后，先授膜荚黄芪花粉、套袋，过2小时至4天后再授水稻自身花粉，套袋，留种得到F1代黄芪稻植株；

(2)分子标记选择：利用PCR法对F₁代黄芪稻植株进行DNA检测，筛选出具有黄芪物种专化DNA的单株，套袋留种得到F₂代黄芪稻植株；

(3)自交留种：利用PCR法对F₂代及其后代黄芪稻植株进行DNA检测，直至筛选出具有黄芪物种专化DNA、种皮颜色为红色、性状稳定的株系；

所述黄芪稻为-其基因组DNA中带有257bp标记的黄芪物种专化的特异条带、161bp标记的Rc基因特征条带和493bp标记的Rd基因特征条带的单株。

具体地，上述DNA检测257bp标记的黄芪物种特异条带的具体操作为：利用上游引物HSTF1：GCATTCCTATGGTTCAAGTCCC和下游引物HSTR1：CAAATTGGTGTTGCTGGAAGTT，进行聚合酶链式反应，扩增程序为94℃，3min；94℃，30S；60℃，20S；72℃，20S，共35个循环。

具体地，上述DNA检测161bp标记的Rc基因特征条带的具体操作为：提取黄芪稻植株叶片DNA，利用上游引物HSTF2：CCACCTTCAAATCAATTCTTCC和

下游引物HSTR2：CCACCGCCTGCAGCGCCGCT，进行聚合酶链式反应，扩增程序为94℃，3min；94℃，30S；53℃，20S；72℃，20S，共35个循环。

具体地，上述DNA检测493bp标记的Rd基因特征条带的具体操作为：提取黄芪稻植株叶片DNA，利用

上游引物HSTF3：AGCTATACTCCCCCTGTCCTG和