[发明专利]蚯蚓弹力蛋白与蚓激酶的联合制备工艺

说明书

本发明公开了一种蚯蚓弹力(胶原)蛋白与蚓激酶的联合制备工艺，以蚯蚓为原料，通过冷冻刻蚀法使甲壳层与弹性蛋白层彻底分离，收集得到的蚯蚓渗出液作为浆料，可以用于生产蚓激酶；剩余的部分通过逆流悬浮法提纯弹力胶原蛋白，再经过煮胶，脱色，膜分离，浓缩，冷冻干燥等步骤获取蚯蚓弹力胶原蛋白。本发明提高了蚯蚓的利用度，且生产蚯蚓弹力胶原蛋白和蚓激酶的过程中无任何添加剂组分，提高了蚯蚓弹力(胶原)蛋白和蚓激酶的品质，降低了蚯蚓弹力(胶原)蛋白和蚓激酶的生产成本，且制备工艺简单，不会影响蚓激酶活力，工业化生产。

技术领域

本发明涉及蚯蚓领域，尤其涉及一种蚯蚓弹力(胶原)蛋白与蚓激酶的联合制备工艺。

背景技术

古医典载蚯蚓性寒无毒，归肝，肺，肾三经。有祛风解热，利尿消炎，平喘活络功效；蚯蚓为佐剂的中药方剂，官书民传，百千无计，沿用古今。当今，有大量致力于将蚯蚓功效导入社会生产力为目的的机构和组织出现；围绕蚯蚓医药保健，蚯蚓功能食品，蚯蚓蛋白饲料的研发热点，悄然形成了“蚯蚓精细化工”科技门类。围绕蚯蚓规模养殖在农牧业方面的创新实践，大同小异的“蚯蚓沙龙”“蚯蚓产业联盟”民间组织和实体企业，网搜实名者，俯拾即是。

在欧美蚯蚓行业在拓展农业，环保产业市场方面，是大产业，自成景色。在中国，抗栓药蚓激酶的产业化，极大的推动我国蚯蚓事业发展，但同时存在起步晚，规模小不成气候技术落后的瓶颈限制。从国情视角看中国蚯蚓产业，其科技创新之路在于：小蚯蚓，高技术，产业化，网络大产业，植根蚯蚓农业，蚯蚓环保两大市场。其中蚯蚓精细化工高技术的支撑必不可少。但传统的制备工艺只能从蚯蚓中提取单一产品，这必然造成一定的浪费，使得蚯蚓利用度低。

蚯蚓体含有大量弹力蛋白与胶原蛋白，使得活蚯蚓体表能永远保持湿润,其蠕动过程.体长可在4-5倍范围内伸缩变化自如，此皆因弹力蛋白和胶原蛋白的存在使然。

医界认为于人体而言，胶原蛋白决定肌肤的柔润饱满，弹性蛋白决定肌肤的紧致弹力两者缺一不可。网搜有文报导蚯蚓皮膜含少量胶原蛋白.冰冻刻蚀技术实证说明，弹性蛋白集中在蚯蚓体壁，鉴于弹力蛋白与胶原蛋白天然共生,以及本专利在提取弹性蛋白过程未刻意对胶原蛋白作进一步分离的实情，故本专利中弹力蛋白和胶原蛋白以“弹力(胶原)蛋白”或简化为“弹力胶原蛋白”称谓。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种蚯蚓弹力(胶原)蛋白与蚓激酶的联合制备工艺，能够同时提取蚓激酶,提高了蚯蚓的利用度。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种蚯蚓弹力(胶原)蛋白与蚓激酶的联合制备工艺，包括：

a)冰冻刻蚀

1)低温速冻：排空蚯蚓腹腔杂物后，经清洗干净后置于温度为-45℃下4～8h，得到冻蚯蚓；

2)恒温解冻：将步骤1)得到的冻蚯蚓转移至70～80℃下解冻，收集蚯蚓渗出液；

b)逆流悬浮法分离弹性蛋白

将步骤a)中收集完蚯蚓渗出液后剩余的物质经逆流悬浮分离，去除杂质，得到蚯蚓弹性蛋白；

c)提取蚯蚓弹力(胶原)蛋白

将步骤b)得到的蚯蚓弹性蛋白中加入去离子水，在80～90℃的水浴锅中保温2h后，真空负压抽滤，得到滤出液，将滤出液脱色得到蚯蚓弹力(胶原)蛋白液；

d)提取，浓缩蚯蚓弹力(胶原)蛋白

将步骤c)得到的蚯蚓弹力(胶原)蛋白液在10000r/min下离心澄清，并将澄清液通过截留分子量6000～100000D的中空纤维柱分级、浓缩，得弹力(胶原) 蛋白浓缩液；

e)将步骤d)得到的弹力(胶原)蛋白浓缩液在温度为-75℃，压强为10-15Pa 条件下冷冻干燥，得到蚯蚓弹力(胶原)蛋白；