[发明专利]一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR系统在审
| 申请号: | 201910646727.X | 申请日: | 2019-07-17 |
| 公开(公告)号: | CN110387405A | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
| 发明(设计)人: | 程奇;孙文丽 | 申请(专利权)人: | 浙江善测禾骑士生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844;C12N15/113;C12N9/50 |
| 代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 李冉 |
| 地址: | 314000 浙江省嘉兴市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 常温恒温 检测系统 扩增系统 快速检测 核酸 病毒核酸检测 分子检测技术 核酸扩增系统 蛋白酶系统 特异性检测 高灵敏度 核酸扩增 利用基因 引导序列 有机结合 痕量 探针 蛋白 检测 保证 | ||
1.一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,包括常温恒温扩增系统和CRISPR检测系统;所述CRISPR检测系统设置在所述常温恒温扩增系统的下游;其中所述常温恒温扩增系统包括核酸扩增系统和RNA转录系统;其中所述CRISPR检测系统包括RNA引导序列、检测蛋白Cas13和RAA探针。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统还包括为反应提供合适温育环境,且能激发并检测信号的仪器。
3.根据权利要求1或2所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述核酸扩增系统为重组酶介导核酸扩增系统;包括逆转录酶,重组酶,单链结合蛋白,DNA聚合酶,辅助蛋白,恒温常温扩增系统化学试剂和RAA引物组。
4.根据权利要求1所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述RNA转录系统为T7转录系统;所述T7转录系统包括T7转录酶。
5.根据权利要求3所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述恒温常温扩增系统化学试剂包括Tris、RNase抑制剂、dNTPs、rNTP、磷酸肌酸二钠盐、乙酸钾、海藻糖、甘露醇、聚乙二醇、二硫苏糖醇、PCR引物、引导RNA和taqman探针。
6.根据权利要求4所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述RAA引物中含有T7启动子。
7.根据权利要求1所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述RNA引导序列由探针区和通用区组成;所述探针区为靶标序列高度同源的序列;所述通用区含有发卡状结构,引导检测蛋白Cas13识别并酶切探针区与RNA模板的结合区域。
8.根据权利要求1所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述RAA探针为RNA探针,所述RNA探针的一端利用荧光发光基团修饰,另一端利用荧光淬灭基团修饰。
9.根据权利要求1所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述荧光发光基团为FAM、HEX、VIC、JOE、Texas Red、Cy3、Cy5或TAMRA中的任意一种。
10.根据权利要求1所述的一种快速检测核酸的(RT)RAA-CRISPR蛋白酶系统,其特征在于,所述荧光淬灭基团BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1或Tamra中的一种。
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