[发明专利]马齿苋中一种二氢吲哚羧酸类生物碱及其提取分离方法与用途有效
| 申请号: | 201910640364.9 | 申请日: | 2019-07-16 |
| 公开(公告)号: | CN110256326B | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
| 发明(设计)人: | 英锡相;徐纹;张文洁 | 申请(专利权)人: | 辽宁中医药大学 |
| 主分类号: | C07D209/08 | 分类号: | C07D209/08;A61P35/00;A61P25/00;A61K31/404;A23L33/00 |
| 代理公司: | 沈阳亚泰专利商标代理有限公司 21107 | 代理人: | 史力伏 |
| 地址: | 110847 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 马齿苋 一种 吲哚 羧酸 生物碱 及其 提取 分离 方法 用途 | ||
1.一种从马齿苋药材中分离出的二氢吲哚羧酸类生物碱化合物,其特征在于,分子式为:C9H9NO4,化学名为4,5-dihydroxyindoline-1-carboxylic acid,其化学结构式如下:
。
2.如权利要求1所述生物碱化合物的提取分离方法,其特征在于,具体步骤为:
步骤1、取马齿苋干燥药材,采用水煎煮提取,放凉至室温,得药液备用;
步骤2、将步骤1中药液蒸干后上硅胶柱,用乙酸乙酯洗脱,减压回收乙酸乙酯至浸膏,得到乙酸乙酯提取物;
步骤3、将步骤2中乙酸乙酯提取物经聚酰胺柱分离,采用乙醇-水梯度洗脱,水和30%醇部蒸干后上硅胶柱,依次用乙酸乙酯,乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱得到若干洗脱部位,经薄层色谱进行检测,显色,合并显色的洗脱部位,将合并后的洗脱部位经减压浓缩至干,备用;
步骤4、将步骤3中所得物经聚酰胺柱分离,采用乙醇-水梯度洗脱,30%乙醇部分蒸干,备用;
步骤5、将步骤4中所得物经预处理的ODS柱层析分离,用甲醇-水梯度洗脱,得到若干洗脱部位,经薄层色谱进行检测,显色,将各显色的洗脱部位分别减压浓缩至干,得到浓缩物备用;
步骤6、将步骤5中所得物再经预处理的葡聚糖凝胶柱层析分离,用甲醇洗脱,得到若干洗脱部位,经薄层色谱进行检测,显色,合并显色的洗脱部位,将合并后的洗脱部位经减压浓缩至干,备用;
步骤7、对步骤6中所得浓缩物进行HPLC分离制备,以乙腈和0.1%甲酸的体积比为13:87作为流动相,制备得到马齿苋中二氢吲哚羧酸类生物碱化合物。
3.如权利要求2所述提取分离方法,其特征在于,所述步骤1中水煎煮提取2次,每次煎煮2小时,水量为药材的8~16倍。
4.如权利要求2所述的提取分离方法,其特征在于,所述ODS与葡聚糖凝胶的预处理过程为甲醇浸泡过24小时,上柱,用甲醇洗至滴入水中无混浊,再以初始流动相平衡。
5.如权利要求2所述的提取分离方法,其特征在于,所述步骤2中所用流动相洗脱程序为等度洗脱。
6.如权利要求2所述的提取分离方法,其特征在于,所述步骤3和步骤4中用水和乙醇的体积比为100:0,70:30,50:50,30:70和0:100梯度洗脱;所述步骤3中乙酸乙酯和甲醇的体积比为5:1,2:1和1:2梯度洗脱;所述步骤5中用甲醇和水的体积比为30:70,40:60,50:50,60:40,70:30和100:0梯度洗脱。
7.如权利要求2所述的提取分离方法,其特征在于,所述步骤6中用甲醇洗脱程序为等度洗脱。
8.如权利要求1所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
9.如权利要求1所述的化合物在制备神经保护药物中的用途。
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