[发明专利]可显著提高钝顶螺旋藻生长速度和营养物质含量的方法有效
申请号: | 201910625341.0 | 申请日: | 2019-07-11 |
公开(公告)号: | CN110272849B | 公开(公告)日: | 2023-01-03 |
发明(设计)人: | 马玉心;崔大练 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/38;C12N13/00;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 316100 浙江省舟山市普陀区*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 显著 提高 螺旋藻 生长 速度 营养物质 含量 方法 | ||
1.可显著提高钝顶螺旋藻生长速度和营养物质含量的方法,其特征在于所述方法包括下述步骤:
1)以含有灭活的红细菌属和红假单胞菌属细菌的发酵菌液的基础培养基将活化的钝顶螺旋藻培养至对数生长期后期,滤出藻液经离心或过滤洗涤后得藻泥;
2)以含有乙醇和β-紫罗兰酮的优化培养基对步骤1)的藻泥进行第一阶段优化培养,采用橙色光和蓝色光人工LED光源联合照射培养,总光照强度是2500~4500Lux,在18~22℃温度下培养5~10d,获得含有游动细胞的钝顶螺旋藻;
3)在自然光模式培养条件下,另取优化培养基中加入富里酸,将步骤2)的含有游动细胞的钝顶螺旋藻以藻泥形式获取后在优化培养基中进行第二阶段培养,使至少部分游动细胞转化为不动细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述红细菌属细菌是荚膜红细菌,和/或
所述红假单胞菌属细菌是沼泽红假单胞菌。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述发酵菌液的发酵方法是:
配制发酵培养基为:柠檬酸铁铵0.4~1.0g/L、磷酸氢二钾0.3~0.6g/L、硫酸镁0.2~0.4g/L、氯化钠0.4~1.0g/L、酵母粉0.5~2.0g/L、醋酸钠3.0~5.0g/L,其余是蒸馏水;
灭菌后按照个数配比3:1共接种所述红细菌属细菌和所述红假单胞菌属细菌1~1.2×107个/mL,25~28℃温度下、5000~8000Lux持续光照下发酵12~96h,完全灭活并浓缩至密度至少是1.15g/mL即得。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述基础培养基中灭活的红细菌属和红假单胞菌属细菌的发酵菌液的添加量是1.2~1.5mL/L。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述基础培养基组成如下:碳酸氢钠0.2~0.4g/L、硝酸钾0.5~1.0g/L、氯化钠0.4~0.6g/L、硫酸锌0.02~0.03g/L、氯化亚铁0.05~0.08g/L、柠檬酸铁铵0.01~0.02g/L、A5组分1mL/L,其余是水,pH是7.5~9.5。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述橙色光的波长是590~620nm,所述蓝色光的波长是445~475nm,所述橙色光和蓝色光的光照强度比是3~5:1。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述步骤2)的优化培养基中乙醇按体积百分比浓度是2.0~4.2%;
所述步骤2)的优化培养基中β-紫罗兰酮的添加量是0.2~20mg/L。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤3)的优化培养基中富里酸的添加量是35~45mg/L。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤3)的第二阶段培养中,10~12h给予3500~4000Lux光照,培养温度是30~32℃,空气流量是0.5~0.6vvm,培养时间是8~10d。
10.权利要求1~9任一项所述可显著提高钝顶螺旋藻生长速度和营养物质含量的方法在钝顶螺旋藻培养中的应用,其特征在于利用所述方法培养钝顶螺旋藻。
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